应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 芽孢杆菌的同源重组
51/1返回列表
查看: 980  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yuevis

铜虫 (小有名气)

[求助] 芽孢杆菌的同源重组 已有1人参与

我想做多黏芽孢杆菌的同源重组，敲除以及交换基因片段，应该用什么质粒?文献里有的质粒太贵，有的都没有卖……请问这方面的大神一般用什么质粒?

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2017-07-17 14:05:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuevis

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-17 23:22:30
1、pET28a。

2、PET-28a表达载体具有T7启动子及lac调控子，需要较高的IPTG起始浓度才能启动有效表达，可使用1mM-2mM，而大家平时使用的IPTG浓度一般为0.1mM，所以建议大家提高IPTG的浓度。而加入IPTG的时机，一般 ...

感谢您读完回复，请问您有这个相关的文献吗?

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2017-07-18 00:03:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、pET28a。

2、PET-28a表达载体具有T7启动子及lac调控子，需要较高的IPTG起始浓度才能启动有效表达，可使用1mM-2mM，而大家平时使用的IPTG浓度一般为0.1mM，所以建议大家提高IPTG的浓度。而加入IPTG的时机，一般要求菌液OD600达到0.3-0.5时再加入，因为IPTG对于细菌具有较高的毒性，加入过早，会致使细菌生长非常缓慢，甚至死亡。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

yuevis
及时行乐，人生不留遗憾！
2楼2017-07-17 23:22:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuevis

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-17 23:22:30
1、pET28a。

2、PET-28a表达载体具有T7启动子及lac调控子，需要较高的IPTG起始浓度才能启动有效表达，可使用1mM-2mM，而大家平时使用的IPTG浓度一般为0.1mM，所以建议大家提高IPTG的浓度。而加入IPTG的时机，一般 ...

感谢您的回复，请问您有这个相关的文献吗?

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2017-07-18 00:04:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yuevis at 2017-07-18 00:03:37
感谢您读完回复，请问您有这个相关的文献吗?
...

pET28a可以用来做E. coli表达蛋白，应该不能用于芽孢杆菌的基因敲除

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
做一个阳光、开朗的小和尚
5楼2017-07-18 12:37:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +3 yunziaaaaa 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:45 by 王兆江
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +3 weizhong123 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:42 by 公瑾逍遥
[考研] 0856材料与化工，270求调剂 +3 YXCT 2026-03-01 3/150 2026-03-01 19:51 by 无懈可击111
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 材料学硕318求调剂 +9 February_Feb 2026-03-01 11/550 2026-03-01 19:47 by 无懈可击111
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +5 礼堂丁真258 2026-02-28 7/350 2026-03-01 19:12 by Js512888
[考研] 272求调剂 +6 材紫有化 2026-02-28 6/300 2026-03-01 18:58 by 18137688336
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 化工专硕342，一志愿大连理工大学，求调剂 +3 kyf化工 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:49 by yywzz
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 材料284求调剂，一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 10/500 2026-03-01 10:02 by 科研狗111
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭