应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 芽孢杆菌的同源重组
71/1返回列表
查看: 981  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yuevis

铜虫 (小有名气)

[求助] 芽孢杆菌的同源重组 已有1人参与

我想做多黏芽孢杆菌的同源重组，敲除以及交换基因片段，应该用什么质粒?文献里有的质粒太贵，有的都没有卖……请问这方面的大神一般用什么质粒?

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2017-07-17 14:05:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、pET28a。

2、PET-28a表达载体具有T7启动子及lac调控子，需要较高的IPTG起始浓度才能启动有效表达，可使用1mM-2mM，而大家平时使用的IPTG浓度一般为0.1mM，所以建议大家提高IPTG的浓度。而加入IPTG的时机，一般要求菌液OD600达到0.3-0.5时再加入，因为IPTG对于细菌具有较高的毒性，加入过早，会致使细菌生长非常缓慢，甚至死亡。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

yuevis
及时行乐，人生不留遗憾！
2楼2017-07-17 23:22:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuevis

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-17 23:22:30
1、pET28a。

2、PET-28a表达载体具有T7启动子及lac调控子，需要较高的IPTG起始浓度才能启动有效表达，可使用1mM-2mM，而大家平时使用的IPTG浓度一般为0.1mM，所以建议大家提高IPTG的浓度。而加入IPTG的时机，一般 ...

感谢您读完回复，请问您有这个相关的文献吗?

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2017-07-18 00:03:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuevis

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-17 23:22:30
1、pET28a。

2、PET-28a表达载体具有T7启动子及lac调控子，需要较高的IPTG起始浓度才能启动有效表达，可使用1mM-2mM，而大家平时使用的IPTG浓度一般为0.1mM，所以建议大家提高IPTG的浓度。而加入IPTG的时机，一般 ...

感谢您的回复，请问您有这个相关的文献吗?

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2017-07-18 00:04:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yuevis at 2017-07-18 00:03:37
感谢您读完回复，请问您有这个相关的文献吗?
...

pET28a可以用来做E. coli表达蛋白，应该不能用于芽孢杆菌的基因敲除

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
做一个阳光、开朗的小和尚
5楼2017-07-18 12:37:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuevis

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zhaozhibozhi at 2017-07-18 12:37:02
pET28a可以用来做E. coli表达蛋白，应该不能用于芽孢杆菌的基因敲除
...

请问，我在文献里看过两三个用于芽孢杆菌敲除的质粒，要不太贵，要不就没货。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2017-07-18 13:02:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuevis

铜虫 (小有名气)
有人有相关的质粒，或者知道吗

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2017-07-18 16:10:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yuevis 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 0856求调剂285 +10 吕仔龙 2026-02-28 10/500 2026-03-01 21:37 by 公瑾逍遥
[考研] 0805总分292，求调剂 +7 幻想之殇 2026-03-01 7/350 2026-03-01 21:22 by 公瑾逍遥
[考研] 299求调剂 +3 Y墨明棋妙Y 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:01 by tangxiaotian
[考研] 0856材料与化工，270求调剂 +3 YXCT 2026-03-01 3/150 2026-03-01 19:51 by 无懈可击111
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 12/600 2026-03-01 19:48 by 好好好1233
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +5 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:47 by 无际的草原
[考研] 材料学硕318求调剂 +9 February_Feb 2026-03-01 11/550 2026-03-01 19:47 by 无懈可击111
[考研] 295求调剂 +7 19171856320 2026-02-28 7/350 2026-03-01 18:54 by 18137688336
[考研] 0857调剂 +3 一ll半 2026-02-28 3/150 2026-03-01 18:32 by 热情沙漠
[考研] 材料类求调剂 +10 wana_kiko 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:11 by 海嵙Y
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 281求调剂 +4 2026计算机_诚心 2026-03-01 7/350 2026-03-01 17:20 by 2026计算机_诚心
[考研] 化工专硕342，一志愿大连理工大学，求调剂 +3 kyf化工 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:49 by yywzz
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭