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多肉宝宝

新虫 (初入文坛)

[求助] Western blot没有内参条带 已有1人参与

我做了好几次WB可是没有连内参都没有,可能是因为什么原因啊?下图是从细胞中提的蛋白跑的胶,转完膜以后可以看见转上的三色预染marker,转完膜的胶考染也没有条带,可是就是爆不出内参条带,这是为什么?

Western blot没有内参条带


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拜拜涂

新虫 (小有名气)

没有提出蛋白,用错抗体,剪错条带等等

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2楼2017-05-27 00:05:22
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多肉宝宝

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 拜拜涂 at 2017-05-27 00:05:22
没有提出蛋白,用错抗体,剪错条带等等

跑的电泳图不是说明提出了蛋白吗?

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3楼2017-05-27 00:10:18
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多肉宝宝

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 拜拜涂 at 2017-05-27 00:05:22
没有提出蛋白,用错抗体,剪错条带等等

请问一下,这个有没有可能是与封闭的牛奶有关?封闭用的牛奶一般可以用几次?

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4楼2017-05-27 00:12:00
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拜拜涂

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 多肉宝宝 at 2017-05-27 00:12:00
请问一下,这个有没有可能是与封闭的牛奶有关?封闭用的牛奶一般可以用几次?
...

牛奶挺便宜,你就现配现用吧。

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5楼2017-05-27 00:16:51
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拜拜涂

新虫 (小有名气)

6楼2017-05-27 00:17:28
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多肉宝宝

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 拜拜涂 at 2017-05-27 00:16:51
牛奶挺便宜,你就现配现用吧。
...

如果封闭的牛奶用过几次,再用的话是不是应该会影响封闭的效果?

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7楼2017-05-27 00:26:59
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拜拜涂

新虫 (小有名气)

这跟封闭没有关系吧,封闭不好背景比较黑,也不可能没有条带,建议你换抗体重做一次试试

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8楼2017-05-27 00:28:36
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多肉宝宝

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 拜拜涂 at 2017-05-27 00:28:36
这跟封闭没有关系吧,封闭不好背景比较黑,也不可能没有条带,建议你换抗体重做一次试试

好的,谢谢!

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9楼2017-05-27 00:30:05
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拜拜涂

新虫 (小有名气)

10楼2017-05-27 00:32:58
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