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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 琼脂糖凝胶电泳图
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似水无痕5476

新虫 (小有名气)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳图 已有1人参与

大家晚上好，细菌提取DNA，PCR完成之后跑的琼脂糖凝胶电泳图这个样子，前面有很多不明显的条带，请问是什么情况？

琼脂糖凝胶电泳图


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把生活过成一首诗。
1楼 2017-04-24 21:33:22
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1234567adfg

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-24 22:38:21
可能是电泳槽系统温度过高，或者制胶的时候没有凝固好，

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似水无痕5476
2楼2017-04-24 21:47:07
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似水无痕5476

新虫 (小有名气)
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引用回帖:
2楼: Originally posted by 1234567adfg at 2017-04-24 21:47:07
可能是电泳槽系统温度过高，或者制胶的时候没有凝固好，

我看到marker也有这种现象，是不是就说明不是样品的问题。

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把生活过成一首诗。
3楼2017-04-24 21:53:35
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曼鱼0429

木虫 (正式写手)
找到原因了吗？是不是降解了？

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……
4楼2017-04-24 22:45:53
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何军爱学习

新虫 (小有名气)
非特异性扩增

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5楼2017-04-24 22:52:51
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何军爱学习

新虫 (小有名气)
退火温度可能偏低

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6楼2017-04-24 22:53:25
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draco1987

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1. Marker有一点拖尾，但是没有明显的杂带，可能是电泳缓冲液比较脏，或者做胶的时候技术不大好，或者电泳槽的设备比较垃圾散热差；
2. PCR产物的泳道上方明显有一些杂带，这个是PCR产物的问题，有较小的几率是非特异性扩增产物（但是一般这种杂带都是比主带小的，所以你这个不像，除非你延伸时间设的比预期产物长很多？）；你这种情况，我判断很大可能是PCR体系里基因组DNA模板加的比较多，结果电泳时还能看得到基因组DNA的微弱条带。
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7楼2017-04-25 17:59:34
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似水无痕5476

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 曼鱼0429 at 2017-04-24 22:45:53
找到原因了吗？是不是降解了？

没找到，应该不是降解了。

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把生活过成一首诗。
8楼2017-04-25 19:55:08
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似水无痕5476

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 1234567adfg at 2017-04-24 21:47:07
可能是电泳槽系统温度过高，或者制胶的时候没有凝固好，

那我送到生物公司测序能不能测出来

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把生活过成一首诗。
9楼2017-04-26 09:44:03
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似水无痕5476

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by draco1987 at 2017-04-25 17:59:34
1. Marker有一点拖尾，但是没有明显的杂带，可能是电泳缓冲液比较脏，或者做胶的时候技术不大好，或者电泳槽的设备比较垃圾散热差；
2. PCR产物的泳道上方明显有一些杂带，这个是PCR产物的问题，有较小的几率是非特 ...

那请问送到生物公司测序能不能测出来

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把生活过成一首诗。
10楼2017-04-26 09:44:42
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