| 查看: 2027 | 回复: 12 | |||
[求助]
求助PCR以前能出条带现在却没有了 已有1人参与
|
|||
|
大四作为毕设，时间没多少了，pcr又出问题，求各位大神帮忙了！ 1.一开始是用老师提的基因组为模板，做了很多次都有条带； 2.后来老师提的基因组快用完了，我就自己提了基因组（模板浓度稀释到和之前一样），做50ul*5的大体系，大孔全部上样，条带很浅，曝光才能看到 3.为了优化，我又做了25ul的小体系，模板浓度加倍、减半，又设置了4个梯度退火温度，一共六管样品，10ul上样全无条带！只有很亮的引物二聚体。 4.今天又试了一次，把之前老师提的基因组剩下的一点点拿来做阳性对照，结果也没有条带 自己想法： 1.所以反应体系和反应温度都没有改变，唯一记得有不同的是3和4用的taq酶是没有加甘油的，我有查到甘油会影响特异性，不过现在不是杂带的问题而是不出条带的问题。 2.如果说是操作中的偶然失误的话，我不至于做了那么多管一管都没出条带吧 3.还有大体系有条带怎么小体系就没有了？ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有299人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR问题求助
已经有16人回复
- 【求助/交流】寻求用通用引物进行菌落PCR，无条带的原因
已经有3人回复
- 【求助/交流】PCR以前能出来目的条带，现在一直弥散，诸位帮忙分析一下
已经有4人回复
lusandanooo
银虫 (小有名气)
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 132.1
- 散金: 3
- 红花: 5
- 帖子: 260
- 在线: 96.2小时
- 虫号: 4149251
- 注册: 2015-10-16
- 性别: GG
- 专业: 林产化学
6楼2017-04-14 14:59:02
yesucao
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 2
- 应助: 51 (初中生)
- 金币: 3877.1
- 散金: 45
- 红花: 6
- 帖子: 374
- 在线: 203.4小时
- 虫号: 810829
- 注册: 2009-07-17
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2017-04-13 23:08:43
2楼2017-04-13 18:13:11
lusandanooo
银虫 (小有名气)
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 132.1
- 散金: 3
- 红花: 5
- 帖子: 260
- 在线: 96.2小时
- 虫号: 4149251
- 注册: 2015-10-16
- 性别: GG
- 专业: 林产化学
7楼2017-04-14 15:01:01
lusandanooo
银虫 (小有名气)
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 132.1
- 散金: 3
- 红花: 5
- 帖子: 260
- 在线: 96.2小时
- 虫号: 4149251
- 注册: 2015-10-16
- 性别: GG
- 专业: 林产化学
10楼2017-04-14 15:50:33
3楼2017-04-13 19:04:23
5楼2017-04-13 23:38:26
8楼2017-04-14 15:18:42
9楼2017-04-14 15:34:16
