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新虫 (初入文坛)

[求助] 之前做过的PCR重复不出来,求大神帮忙看一下??急!急!急!不然就得换导师了。已有3人参与

这是设计的大肠杆菌DH5α引物

F:5,CGCGGATCCATGGCTGTTACTAATGTCG 3,
R:5,CCGCTCGAGTTAAGCGGATTTTTTCG 3,

PCR体系(25ul):
                        模板           :  2ul
                        Taq酶         : 0.125ul
                        primer         :  0.625ul
                                           :0.625ul
                      10xbuffer       : 2.5ul
                      2.5mMdNTP  :  2ul
                       dd水            : 17.125ul

条件:1.  95℃              4min
          2.  95℃              40s
               61℃              30s
               72℃              3min
          3.  72℃              10min
这是体系和条件,求大神帮忙,帮我找找原因,要崩溃了。。。。。



之前做过的PCR重复不出来,求大神帮忙看一下??急!急!急!不然就得换导师了。
年前普通Taq酶P的条带.png


之前做过的PCR重复不出来,求大神帮忙看一下??急!急!急!不然就得换导师了。-1
年前高保真酶primer starP出的条带.png


之前做过的PCR重复不出来,求大神帮忙看一下??急!急!急!不然就得换导师了。-2
年后普通taq酶P的,没有条带.png


之前做过的PCR重复不出来,求大神帮忙看一下??急!急!急!不然就得换导师了。-3
1.jpg


之前做过的PCR重复不出来,求大神帮忙看一下??急!急!急!不然就得换导师了。-4
2.jpg
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xzx018

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

根据以前的实验结论,基因组模板有问题的可能性很大,你可以提出来P下试试
19楼2017-09-05 19:06:28
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