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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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小瓜子

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] 【求助蛋白电泳】请大家看看我跑的SDS-PAGE蛋白电泳图 已有2人参与

第一次跑蛋白电泳,想问一下那个有几个带中间有一条竖线是为啥呀?
另外我这个跑出来的结果算是弥散的吗?
求各位大神解答,蟹蟹~~

【求助蛋白电泳】请大家看看我跑的SDS-PAGE蛋白电泳图
20170310_174530.jpg
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sensen924

兑换贵宾

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我倒是没遇到过这种情况,还有可能就是你的样品有杂质。你下次把样品离心取上清试试。

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愿一切有缘人平安幸福
6楼2017-03-13 19:46:17
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swjs37sunwei

专家顾问

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小瓜子: 金币+5, ★★★很有帮助 2017-03-14 16:24:56
跑出来的胶呈弥散最主要应该是胶制的不好,重新换块胶试试;
另外如果样品是细胞裂解总蛋白加loading煮沸后最好短暂离心后再上样(13000rpm 2min);
还有一点如果想胶跑出来的好看尽量用低电压去跑。
8楼2017-03-14 11:26:04
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sensen924

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

觉得和你制的胶有关系。你用的是百分之多少的胶

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愿一切有缘人平安幸福
2楼2017-03-13 18:58:30
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13132551195

管理员

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3楼2017-03-13 19:26:52
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飞翔的吉大人

超级版主

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-15 09:19:23
Marker跑的挺好的,说明胶问题不大,跑蛋白电泳要注意样品离子浓度不要太大,浓缩胶低电压一般70,分离胶适当提高一些,我一般是110V,全程低温加冰,多多的冰

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9楼2017-03-14 14:07:27
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小瓜子

专家顾问

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引用回帖:
9楼: Originally posted by 飞翔的吉大人 at 2017-03-14 14:07:27
Marker跑的挺好的,说明胶问题不大,跑蛋白电泳要注意样品离子浓度不要太大,浓缩胶低电压一般70,分离胶适当提高一些,我一般是110V,全程低温加冰,多多的冰

我为了跑得快用120V跑的,因为是成品胶,所以全程没变电压。。。TT
12楼2017-03-14 16:20:38
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sensen924

超级版主

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引用回帖:
7楼: Originally posted by 小瓜子 at 2017-03-14 09:13:56
第一次做也不知道要离心T_T
煮完之后离心吗?那大约多少转,离心多久啊?会把蛋白离心到沉淀里面吗?...

最好是重提蛋白,谨慎操做。要是样品难弄到,你试试500转,1~2分钟。只是推测,希望能给你提供个参考。加油

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愿一切有缘人平安幸福
14楼2017-03-14 20:03:05
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普通回帖

小瓜子

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
2楼: Originally posted by sensen924 at 2017-03-13 18:58:30
觉得和你制的胶有关系。你用的是百分之多少的胶

用的是10%的胶,实验室里买的Nu-PAGE成品胶。
4楼2017-03-13 19:39:37
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小瓜子

主管区长

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引用回帖:
3楼: Originally posted by 13132551195 at 2017-03-13 19:26:52
你的胶制作的不好,

只是胶的问题吗?那为啥有的道有,有的没有呢?
5楼2017-03-13 19:40:58
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小瓜子

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
6楼: Originally posted by sensen924 at 2017-03-13 19:46:17
我倒是没遇到过这种情况,还有可能就是你的样品有杂质。你下次把样品离心取上清试试。

第一次做也不知道要离心T_T
煮完之后离心吗?那大约多少转,离心多久啊?会把蛋白离心到沉淀里面吗?
7楼2017-03-14 09:13:56
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陪你砸流星

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

跑一个双向电泳试试,你的样品不纯

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10楼2017-03-14 14:13:16
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