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【求助蛋白电泳】请大家看看我跑的SDS-PAGE蛋白电泳图
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小瓜子
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【求助蛋白电泳】请大家看看我跑的SDS-PAGE蛋白电泳图
已有2人参与
第一次跑蛋白电泳,想问一下那个有几个带中间有一条竖线是为啥呀?
另外我这个跑出来的结果算是弥散的吗?
求各位大神解答,蟹蟹~~
20170310_174530.jpg
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2017-03-13 15:19:16
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感谢参与,应助指数 +1
我倒是没遇到过这种情况,还有可能就是你的样品有杂质。你下次把样品离心取上清试试。
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【答案】应助回帖
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2017-03-14 16:24:56
跑出来的胶呈弥散最主要应该是胶制的不好,重新换块胶试试;
另外如果样品是细胞裂解总蛋白加loading煮沸后最好短暂离心后再上样(13000rpm 2min);
还有一点如果想胶跑出来的好看尽量用低电压去跑。
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8楼
2017-03-14 11:26:04
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觉得和你制的胶有关系。你用的是百分之多少的胶
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2017-03-13 18:58:30
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你的胶制作的不好,
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2017-03-13 19:26:52
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Marker跑的挺好的,说明胶问题不大,跑蛋白电泳要注意样品离子浓度不要太大,浓缩胶低电压一般70,分离胶适当提高一些,我一般是110V,全程低温加冰,多多的冰
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飞翔的吉大人
at 2017-03-14 14:07:27
Marker跑的挺好的,说明胶问题不大,跑蛋白电泳要注意样品离子浓度不要太大,浓缩胶低电压一般70,分离胶适当提高一些,我一般是110V,全程低温加冰,多多的冰
我为了跑得快用120V跑的,因为是成品胶,所以全程没变电压。。。TT
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12楼
2017-03-14 16:20:38
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at 2017-03-14 09:13:56
第一次做也不知道要离心T_T
煮完之后离心吗?那大约多少转,离心多久啊?会把蛋白离心到沉淀里面吗?...
最好是重提蛋白,谨慎操做。要是样品难弄到,你试试500转,1~2分钟。只是推测,希望能给你提供个参考。加油
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2017-03-14 20:03:05
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觉得和你制的胶有关系。你用的是百分之多少的胶
用的是10%的胶,实验室里买的Nu-PAGE成品胶。
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2017-03-13 19:39:37
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你的胶制作的不好,
只是胶的问题吗?那为啥有的道有,有的没有呢?
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2017-03-13 19:40:58
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sensen924
at 2017-03-13 19:46:17
我倒是没遇到过这种情况,还有可能就是你的样品有杂质。你下次把样品离心取上清试试。
第一次做也不知道要离心T_T
煮完之后离心吗?那大约多少转,离心多久啊?会把蛋白离心到沉淀里面吗?
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7楼
2017-03-14 09:13:56
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跑一个双向电泳试试,你的样品不纯
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10楼
2017-03-14 14:13:16
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