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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 其他 » 关于纯化蛋白的一些问题
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Tutub

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于纯化蛋白的一些问题已有3人参与

最近在做纯化蛋白的实验，用的阴离子交换柱，纯化过程中出的杂峰很高，剃度洗脱的蛋白峰比较小，但是峰还是很明显的，经过电泳分析，杂峰有条带，而剃度洗脱的峰显示不出蛋白条带，这是为什么？求帮助

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1楼2017-03-12 09:14:52
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
问题没描述清楚，洗脱的杂峰是什么时候洗脱的，是没拉梯度直接洗脱的么。拉梯度怎么电泳没蛋白。直接洗脱不纯很正常，拉梯度洗脱蛋白浓度变低了，条带会变淡，不至于没有，问题有可能出在电泳上。
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4楼2017-03-13 13:42:55
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辉102526

新虫 (初入文坛)
梯度溶液前的溶液ph值可能不太对，不适于阴离子纯化条件，会提前被洗掉

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Tutub
2楼2017-03-13 00:34:04
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Tutub

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 辉102526 at 2017-03-13 00:34:04
梯度溶液前的溶液ph值可能不太对，不适于阴离子纯化条件，会提前被洗掉

那我要的蛋白等电点是5.6，那个溶液的ph应该是多少？

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3楼2017-03-13 09:24:57
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Tutub

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hc-material at 2017-03-13 13:42:55
问题没描述清楚，洗脱的杂峰是什么时候洗脱的，是没拉梯度直接洗脱的么。拉梯度怎么电泳没蛋白。直接洗脱不纯很正常，拉梯度洗脱蛋白浓度变低了，条带会变淡，不至于没有，问题有可能出在电泳上。

梯度洗脱前洗的杂峰，可是杂峰有条带，感觉蛋白全部在杂峰里面出来了。

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5楼2017-03-13 21:18:25
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