| 查看: 6865 | 回复: 9 | ||||
胖妞光芒万丈新虫 (初入文坛)
|
[求助]
关于His-Tag的一些疑问 已有2人参与
|
|
食品方向，涉及分子生物学，求助各位大神。 1.将编码酶的基因插入质粒，为了便于后期的蛋白分离纯化，需要插入HIS-TAG，据说要在标签之后再插入一小段无关的序列，想问下插入的这段碱基序列有标准吗？ 2.目的基因与标签之间要设置酶切位点，目的是什么呀？酶切位点不是切基因的吗，但是标签的6个组氨酸不是要翻译出来跟目的蛋白一起分离纯化吗？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 蛋白表达纯化鉴定精华 | 蛋白纯化 |
» 猜你喜欢
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有56人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有1人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于带HIS-tag的蛋白纯化后超滤浓缩问题
已经有6人回复
- 关于NTA-Ni纯化带有Flag标签的融合蛋白
已经有4人回复
- 蛋白相互作用，钓取受体
已经有7人回复
- His标签蛋白纯化
已经有0人回复
- 想问一下关于用pET-32a载体表达小片段蛋白
已经有1人回复
- 纯化蛋白时关于溶液中咪唑的问题
已经有7人回复
- 关于PCR引物中加入酶切位点的设计方法和酶切问题！ 新手，求帮忙！！
已经有4人回复
- 关于ChIP染色质免疫沉淀技术的疑惑
已经有6人回复
- 关于蛋白质的鉴定定量什么之类的问题~((T_T))~
已经有10人回复
- 酵母表达载体PYES-DEST52的使用问题，高手请进
已经有0人回复
- 关于变性条件下his-tag重组融合蛋白不结合镍柱以及部分结合镍柱情况
已经有17人回复
- 关于肠激酶
已经有2人回复
- 关于his-tag蛋白的分离和纯化 微生物产生！文献多多益善
已经有10人回复
- 关于带his-tag的膜蛋白镍柱纯化
已经有10人回复
- 关于T7－Tag？
已经有8人回复
- 求助，关于CO-IP的一些问题！！
已经有5人回复
- 【求助/交流】关于蛋白提纯
已经有5人回复
- 【求助/交流】请教一个关于his-tag的问题
已经有3人回复
- 【求助/交流】关于蛋白纯化透析的问题
已经有2人回复
- 【求助/交流】关于his-tag的western blot
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于his-tag纯化
已经有9人回复
- 【求助】 关于原核表达【有效日期截止：2011年2月28日】
已经有7人回复
- 【求助/交流】关于his-tag标签是否提高蛋白收率的问题
已经有1人回复
2楼2017-02-23 10:56:05
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- MolEPI: 1
- 应助: 907 (博后)
- 金币: 17093.4
- 散金: 1654
- 红花: 120
- 沙发: 41
- 帖子: 14507
- 在线: 2179.5小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
3楼2017-02-23 14:40:46
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-02-24 08:46:16
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-02-24 08:46:16
|
1.无关序列指的是在标签和目的蛋白之间的一个linker，一般长度为10~15个氨基酸，且为疏水性氨基酸，目的是为了防止标签被目的蛋白包裹而不利于纯化. 2.酶切位点是为了在纯化之后切除标签，从而排除标签对后期实验的影响 发自小木虫Android客户端 |
4楼2017-02-23 17:41:14
胖妞光芒万丈
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 186.5
- 帖子: 5
- 在线: 5.1小时
- 虫号: 5644049
- 注册: 2017-02-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
5楼2017-02-23 21:47:41
ULYSSEESWB
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 39 (小学生)
- 金币: 7653.9
- 散金: 2508
- 红花: 7
- 帖子: 596
- 在线: 1088.5小时
- 虫号: 939000
- 注册: 2010-01-08
- 专业: 药理学其他科学问题
6楼2017-02-24 11:06:06
7楼2017-02-26 16:06:04
8楼2017-02-26 17:31:24
|
sorry，不应该笼统的说是疏水氨基酸，比较普遍的是（G4S）n linker，G4S 为4个甘氨酸1个氨酸，具体你可以参阅网上资料。另外，不好意思这么久才回复，还没有养成天天关注小木虫的习惯 发自小木虫Android客户端 |
9楼2017-03-10 15:36:50
10楼2017-03-10 15:39:48
