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853517161

新虫 (初入文坛)

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[求助] HPLC检测三氟乙酸峰形部队称，拖尾严重。已有3人参与

HPLC检测样品中三氟乙酸的含量，我使用的流动相为磷酸（0.07%，NAOH调整PH至3）及甲醇，比例为95:5，使用HPLC及的三氟乙酸上样10μL（浓度50μg/ml）,柱温是25℃，检测波长为210nm，最终的到的峰总是出现拖尾现象，理论塔板数也只有4000左右。中间也试着在流动相中加入扫尾剂，改变流动相比例及柱温，依然没有明显改善，请问如何改善峰拖尾问题？

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1楼 2017-02-16 10:13:44

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xixi6253

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

好像是流动相的酸性太强了，调至5看看

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2楼2017-02-16 14:43:11

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风雨之夜vs

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3楼2017-02-16 16:47:42

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kmjiwa

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

建议参考中国药典附录多肽中的醋酸测定法。

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4楼2017-02-16 19:35:30

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zlq88660

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

建议加离子对试剂，酸性条件下烷基硫酸钠，波长还能延长吗，可以的话到254

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医药人，医药心

5楼2017-02-17 16:40:28

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ganlang

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简单套用醋酸测定方法是不会好的，醋酸PKa是4点多，流动相PH值3基本可完全抑制其解离，而三氟乙酸PKa都在1以下，在PH3流动相中完全解离，不适合采用缓冲盐-甲醇体系下普通C18检测，可考虑用纯水相为流动相，采用耐水型色谱柱或干脆离子交换柱

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6楼2017-02-19 07:01:19

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shuibian1115

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引用回帖:

4楼: Originally posted by kmjiwa at 2017-02-16 19:35:30
建议参考中国药典附录多肽中的醋酸测定法。

这个哪版药典附录里面有？！！

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7楼2017-02-19 09:48:43

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shuibian1115

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6楼: Originally posted by ganlang at 2017-02-19 07:01:19
简单套用醋酸测定方法是不会好的，醋酸PKa是4点多，流动相PH值3基本可完全抑制其解离，而三氟乙酸PKa都在1以下，在PH3流动相中完全解离，不适合采用缓冲盐-甲醇体系下普通C18检测，可考虑用纯水相为流动相，采用耐水 ...

离子色谱肯定可以，只是我看好多中文文献HPLC可以测，我就没重复出来

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8楼2017-02-19 09:49:30

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