| 查看: 1785 | 回复: 11 | ||
[求助]
大家好，我想请教一下反相HPLC分析蛋白样品时，前处理应该怎能做 已有5人参与
|
||
|
我之前用过C18，C8 流动相是 A：水 0.1%三氟乙酸 B：乙腈或甲醇 0.085%三氟乙酸 上样是20ul， 今天发现 我的样品在B液中析出大量沉淀 这样会不会对我的柱子有影响啊，因为我发现上样次数多了，检测出的峰偏低 偏少了，甚至没有什么峰了。 我的样品前处理是：将1g样品 溶于10ml PH7.0的50mMPBS中 超速离心取上清。 我想知道，如果我的样品在有机相中沉淀，是不是前处理的问题，如有是的话应该怎么办呢；还是需要调节有机相啊？ 图片中分别是 水；乙腈；甲醇；乙醇；异丙醇；(纯的) 100-200ul样品 +1mL溶剂 离心后的效果 非常感谢大家的帮助!    IMG_0589.JPG |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
基金中了
已经有14人回复
-
关于filecode
已经有7人回复
-
娱乐
已经有6人回复
-
化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？
已经有4人回复
-
关于代码变化问题，想知道的进来
已经有12人回复
-
固定端突然变了，今天
已经有10人回复
-
听说今天filecode变了
已经有47人回复
-
filecode与中标关系的预测
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- HPLC检测雌激素E1, E2, E3
已经有7人回复
- 求助！HPLC做手性分析，正相柱和反相柱有什么区别？
已经有14人回复
- 求一份关于香气成分的HPLC的梯度洗脱计划，用的是C18反相柱
已经有8人回复
- HPLC测含量摸索流动相的问题
已经有19人回复
- [求助] 用HPLC测对苯二酚的甲醇溶液出来多个峰，求高人指点
已经有17人回复
- HPLC测定烟草中农药残留 前处理问题！！！！！！！！！！！！！！！！！
已经有6人回复
- HPLC 用C18反相柱鉴定蛋白纯度，蛋白峰与溶剂峰混在一起怎么办？
已经有11人回复
- 精密仪器的使用和日常维护 比如：GPC，HPLC(戴安)
已经有7人回复
- 高效液相色谱中流动相常用的缓冲盐有哪些?各自的最大吸收值是多少nm?
已经有12人回复
- 流动相不变，样品浓度不变，溶剂改变，峰面积会改变吗？
已经有17人回复
- 色谱分析前样品处理
已经有10人回复
- 求助：关于辅料在HPLC中杂质峰很多，干扰多
已经有4人回复
- 【求助】HPLC反相制备柱可以用异丙醇+甲醇做流动相吗？
已经有8人回复
- 【求助/交流】反相HPLC分离蛋白质
已经有5人回复
archbishop
禁虫 (职业作家)
- ACI: 2
- 应助: 190 (高中生)
- 贵宾: 3.213
- 金币: 13682.5
- 散金: 5394
- 红花: 150
- 沙发: 5
- 帖子: 4552
- 在线: 1148.3小时
- 虫号: 792812
- 注册: 2009-06-12
- 性别: GG
- 专业: 色谱分析
- 管辖: 分析
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xuelvsnow: 金币+5, ★★★很有帮助, O(∩_∩)O谢谢你的文献，给了我些思路。 2015-05-16 14:45:41
感谢参与，应助指数 +1
xuelvsnow: 金币+5, ★★★很有帮助, O(∩_∩)O谢谢你的文献，给了我些思路。 2015-05-16 14:45:41
| TFA、甲醇、乙腈随便一个都能使蛋白沉淀。我建议你查查文献。这里给你找了一篇供参考。 |
» 本帖附件资源列表
-
欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : 0fcfd510bf7aceb0f1000000.pdf
2015-05-15 11:41:49, 62.59 K
4楼2015-05-15 11:41:50
青雅
金虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2751.6
- 散金: 46
- 红花: 3
- 帖子: 594
- 在线: 114.6小时
- 虫号: 2302507
- 注册: 2013-02-26
- 专业: 色谱分析
2楼2015-05-14 23:02:47
xuziling
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1488.5
- 红花: 1
- 帖子: 496
- 在线: 9.1小时
- 虫号: 272485
- 注册: 2006-08-19
- 性别: MM
- 专业: 药学
5楼2015-05-15 11:55:41
organicsuper
木虫 (正式写手)
- 应助: 295 (大学生)
- 金币: 2499.1
- 红花: 15
- 帖子: 712
- 在线: 127.5小时
- 虫号: 1784264
- 注册: 2012-04-28
- 专业: 有机合成
9楼2015-05-16 08:11:25
3楼2015-05-15 08:51:48
mao877516786
铜虫 (正式写手)
- 应助: 59 (初中生)
- 金币: 168.4
- 红花: 3
- 帖子: 551
- 在线: 253.2小时
- 虫号: 1193513
- 注册: 2011-01-20
- 专业: 微生物生理与生物化学
6楼2015-05-15 12:40:42
7楼2015-05-15 19:09:15
8楼2015-05-15 19:10:50
songbingna
金虫 (职业作家)
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 1384.3
- 散金: 1648
- 红花: 30
- 沙发: 1
- 帖子: 3980
- 在线: 342.2小时
- 虫号: 2665702
- 注册: 2013-09-19
- 专业: 自然地理学
10楼2015-05-16 08:52:23
20