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xuelvsnow新虫 (小有名气)
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大家好，我想请教一下反相HPLC分析蛋白样品时，前处理应该怎能做 已有5人参与
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我之前用过C18，C8 流动相是 A：水 0.1%三氟乙酸 B：乙腈或甲醇 0.085%三氟乙酸 上样是20ul， 今天发现 我的样品在B液中析出大量沉淀 这样会不会对我的柱子有影响啊，因为我发现上样次数多了，检测出的峰偏低 偏少了，甚至没有什么峰了。 我的样品前处理是：将1g样品 溶于10ml PH7.0的50mMPBS中 超速离心取上清。 我想知道，如果我的样品在有机相中沉淀，是不是前处理的问题，如有是的话应该怎么办呢；还是需要调节有机相啊？ 图片中分别是 水；乙腈；甲醇；乙醇；异丙醇；(纯的) 100-200ul样品 +1mL溶剂 离心后的效果 非常感谢大家的帮助!    IMG_0589.JPG |
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| TFA、甲醇、乙腈随便一个都能使蛋白沉淀。我建议你查查文献。这里给你找了一篇供参考。 |
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