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新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC检测三氟乙酸峰形部队称,拖尾严重。 已有3人参与

HPLC检测样品中三氟乙酸的含量,我使用的流动相为磷酸(0.07%,NAOH调整PH至3)及甲醇,比例为95:5,使用HPLC及的三氟乙酸上样10μL(浓度50μg/ml),柱温是25℃,检测波长为210nm,最终的到的峰总是出现拖尾现象,理论塔板数也只有4000左右。中间也试着在流动相中加入扫尾剂,改变流动相比例及柱温,依然没有明显改善,请问如何改善峰拖尾问题?
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ganlang

新虫 (初入文坛)

简单套用醋酸测定方法是不会好的,醋酸PKa是4点多,流动相PH值3基本可完全抑制其解离,而三氟乙酸PKa都在1以下,在PH3流动相中完全解离,不适合采用缓冲盐-甲醇体系下普通C18检测,可考虑用纯水相为流动相,采用耐水型色谱柱或干脆离子交换柱
6楼2017-02-19 07:01:19
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xixi6253

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
好像是流动相的酸性太强了,调至5看看
2楼2017-02-16 14:43:11
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风雨之夜vs

新虫 (初入文坛)

3楼2017-02-16 16:47:42
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kmjiwa

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议参考中国药典附录多肽中的醋酸测定法。
4楼2017-02-16 19:35:30
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