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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » HPLC检测三氟乙酸峰形部队称，拖尾严重。
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853517161

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC检测三氟乙酸峰形部队称，拖尾严重。 已有3人参与

HPLC检测样品中三氟乙酸的含量，我使用的流动相为磷酸（0.07%，NAOH调整PH至3）及甲醇，比例为95:5，使用HPLC及的三氟乙酸上样10μL（浓度50μg/ml）,柱温是25℃，检测波长为210nm，最终的到的峰总是出现拖尾现象，理论塔板数也只有4000左右。中间也试着在流动相中加入扫尾剂，改变流动相比例及柱温，依然没有明显改善，请问如何改善峰拖尾问题？
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1楼 2017-02-16 10:13:44
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ganlang

新虫 (初入文坛)
简单套用醋酸测定方法是不会好的，醋酸PKa是4点多，流动相PH值3基本可完全抑制其解离，而三氟乙酸PKa都在1以下，在PH3流动相中完全解离，不适合采用缓冲盐-甲醇体系下普通C18检测，可考虑用纯水相为流动相，采用耐水型色谱柱或干脆离子交换柱
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6楼2017-02-19 07:01:19
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xixi6253

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
好像是流动相的酸性太强了，调至5看看
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2楼2017-02-16 14:43:11
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风雨之夜vs

新虫 (初入文坛)
你在哪里？

发自小木虫Android客户端
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3楼2017-02-16 16:47:42
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kmjiwa

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议参考中国药典附录多肽中的醋酸测定法。
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4楼2017-02-16 19:35:30
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