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853517161

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC检测三氟乙酸峰形部队称,拖尾严重。 已有3人参与

HPLC检测样品中三氟乙酸的含量,我使用的流动相为磷酸(0.07%,NAOH调整PH至3)及甲醇,比例为95:5,使用HPLC及的三氟乙酸上样10μL(浓度50μg/ml),柱温是25℃,检测波长为210nm,最终的到的峰总是出现拖尾现象,理论塔板数也只有4000左右。中间也试着在流动相中加入扫尾剂,改变流动相比例及柱温,依然没有明显改善,请问如何改善峰拖尾问题?
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hexued6933

版主 (著名写手)

日出东方,岂能不败

优秀版主优秀版主优秀版主

TFA酸性很强,没什么保留,建议你增强流动相的酸性,同时减弱洗脱强度.比如采用0.1%磷酸,采用能走纯水的c18柱,应该能解决问题

发自小木虫IOS客户端
大家好,才是真的好
10楼2017-02-19 19:47:25
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xixi6253

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
好像是流动相的酸性太强了,调至5看看
2楼2017-02-16 14:43:11
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风雨之夜vs

新虫 (初入文坛)

3楼2017-02-16 16:47:42
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kmjiwa

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议参考中国药典附录多肽中的醋酸测定法。
4楼2017-02-16 19:35:30
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