| 查看: 2787 | 回复: 22 | ||||
[交流]
关于测序的几个问题
|
||||
|
就是一段2000bp的序列，已经连在了pbs载体上。序列基本是已知的就是为了验证一下顺便看看有没有突变之类的。学姐说现在的那个公司的测序宣传是800，实际可信的就只有600多bp。几个问题是酱紫 1，两端的测序引物似乎是公司提供的存在于载体上的引物？这是不是意味着序列的两端都是可信的，不存在引物后面一段测不准的情况呢 2，同上，如果两端的引物是在载体上，我当初扩增这段序列用的引物（还加上了保护碱基和酶切位点）就没用啦？ 3，那我大概需要新设计几个测序引物呢？位置在哪里比较合适哦 刚从实验室出来，晚上想问问公司的人明天回去再和学姐多交流下，现在坐在通勤上脑袋有点晕，希望大家能帮我理一下思路。。。 补充:看了下测序公司的引物，两端分别是T7和T3。那个这俩我在数据库上看到，他们被标为promoter啊，数据库里有其他的比如M13都被标为primer.这是这俩能够当引物用的意思吗？ 发自小木虫Android客户端 [ Last edited by 梦幻在玩 on 2017-1-14 at 18:51 ] |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 蛋白表达纯化鉴定精华 |
» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有135人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 处理高通量测序数据时遇到几个问题，请高手帮忙解答
已经有0人回复
- 关于测序后基因分型的一些问题。。。求大神解答！
已经有2人回复
- 关于基因家族的几个问题
已经有0人回复
- 关于微生物基因组的几个问题
已经有0人回复
- 高通量测序问题求助.
已经有1人回复
- 关于基因测序问题
已经有4人回复
- 关于基因组计划的几个简单问题
已经有1人回复
- 请教关于基因全长的问题
已经有3人回复
- 关于基因组、测序方案的问题
已经有0人回复
- 测序结果峰图观测的问题
已经有7人回复
- 关于用phusion高保真DNA聚合酶来对DNA测序的问题
已经有0人回复
- 关于454测序的一些问题
已经有0人回复
- 关于载体的问题
已经有1人回复
- 求助，关于测序峰值图全是乱峰和套峰的几个问题
已经有2人回复
- 【求助/交流】求助：关于均一化cDNA文库构建和转录组测序的问题
已经有1人回复
- 【求助/交流】关于测序的问题
已经有3人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
【宁德时代招聘】AI 物理学家
+1/174
-
Analytical Science Advances（Wiley出版社）长期征稿中...
+1/86
-
山东第二医科大学和广州中医药大学药学硕士招生
+1/83
-
Analytical Science Advances（Wiley出版社）长期征稿中...
+1/83
-
中科院深圳先进院成会明院士\唐永炳国家杰青团队招聘
+2/38
-
Analytical Science Advances（Wiley出版社）长期征稿中...
+1/38
-
限广州，征女友
+2/34
-
博士招生
+1/32
-
博士后招聘
+1/27
-
求租南京-栖霞区-尧化门附件有虫友有房子要往外出租吗？来个一室的就行。
+1/17
-
天津大学化学系吴立朋课题组申请考核制博士招生/博后招聘
+1/13
-
天津大学化学系吴立朋课题组申请考核制博士招生/博后招聘
+1/12
-
肿瘤免疫课题组招聘 博后
+1/11
-
北京理工大学集成电路与电子学院国家杰青团队招博士后及科研助理
+1/7
-
海南师范大学招收化学博士（光电功能材料课题组招收博士研究生）
+1/6
-
中国地质大学（武汉）戴志高课题组诚招2026级硕博研究生
+1/5
-
中科院和北京工商大学招收2026博士/化学或生物背景
+1/4
-
实验室研究员
+1/3
-
英国兰卡斯特大学（Lancaster University）大模型、计算机视觉PhD招生
+1/2
-
武汉理工大学胡老师课题组招收2026年博士研究生
+1/2
gyesang
荣誉版主 (著名写手)
-
专家经验: +24 - MolEPI: 31
- 应助: 599 (博士)
- 贵宾: 2.689
- 金币: 24326.9
- 帖子: 2327
- 在线: 623.1小时
- 虫号: 849017
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
1，两端的测序引物似乎是公司提供的存在于载体上的引物？这是不是意味着序列的两端都是可信的，不存在引物后面一段测不准的情况呢 你学姐说的是对的，一般双脱氧测序可以测1000bp 左右，前600-800bp 是准确的，后面的序列如果出现突变不一定真的是突变，也可能是测序的原因造成的。同时，测序时，引物结合位置处的后面约50碱基左右也是不准的，所以一般不用基因特异引物测序，而在载体上设计引物测序 2，同上，如果两端的引物是在载体上，我当初扩增这段序列用的引物（还加上了保护碱基和酶切位点）就没用啦？ 对于测序来说，用不上，载体上有通用引物，就用通用引物测序 3，那我大概需要新设计几个测序引物呢？位置在哪里比较合适哦 你需要再设计一条引物测序就够了，位置在约650bp处设计，加上载体的正反向通用引物，做3个测序反应够了，可以测通 刚从实验室出来，晚上想问问公司的人明天回去再和学姐多交流下，现在坐在通勤上脑袋有点晕，希望大家能帮我理一下思路。。。 补充:看了下测序公司的引物，两端分别是T7和T3。那个这俩我在数据库上看到，他们被标为promoter啊，数据库里有其他的比如M13都被标为primer.这是这俩能够当引物用的意思吗？ 这两个可以当通用引物，T7 的序列是特定的 发自小木虫IOS客户端 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
梦幻在玩18楼2017-01-15 04:00:51
19楼2017-01-15 08:58:08
20楼2017-01-15 10:32:28
21楼2017-01-15 10:32:48
22楼2017-01-15 10:34:36
简单回复
chentao2楼
2017-01-14 18:27
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
chentao3楼
2017-01-14 18:27
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
qdbeer4楼
2017-01-14 18:28
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
1
qdbeer5楼
2017-01-14 18:28
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
1
tableman6楼
2017-01-14 18:32
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
tableman7楼
2017-01-14 18:32
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
假大空8楼
2017-01-14 18:32
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
顶
time889楼
2017-01-14 18:38
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
time8810楼
2017-01-14 18:38
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
超级老快11楼
2017-01-14 18:42
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
l65124012楼
2017-01-14 18:56
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
顶 发自小木虫Android客户端
tan91413楼
2017-01-14 18:58
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
tan91414楼
2017-01-14 18:58
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
tzynew15楼
2017-01-14 19:12
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
nono200916楼
2017-01-14 19:58
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
·
dsctg17楼
2017-01-14 20:20
回复
小兔11123楼
2017-01-15 10:54
回复