| 查看: 2823 | 回复: 22 | ||||
[交流]
关于测序的几个问题
|
||||
|
就是一段2000bp的序列，已经连在了pbs载体上。序列基本是已知的就是为了验证一下顺便看看有没有突变之类的。学姐说现在的那个公司的测序宣传是800，实际可信的就只有600多bp。几个问题是酱紫 1，两端的测序引物似乎是公司提供的存在于载体上的引物？这是不是意味着序列的两端都是可信的，不存在引物后面一段测不准的情况呢 2，同上，如果两端的引物是在载体上，我当初扩增这段序列用的引物（还加上了保护碱基和酶切位点）就没用啦？ 3，那我大概需要新设计几个测序引物呢？位置在哪里比较合适哦 刚从实验室出来，晚上想问问公司的人明天回去再和学姐多交流下，现在坐在通勤上脑袋有点晕，希望大家能帮我理一下思路。。。 补充:看了下测序公司的引物，两端分别是T7和T3。那个这俩我在数据库上看到，他们被标为promoter啊，数据库里有其他的比如M13都被标为primer.这是这俩能够当引物用的意思吗？ 发自小木虫Android客户端 [ Last edited by 梦幻在玩 on 2017-1-14 at 18:51 ] |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 蛋白表达纯化鉴定精华 |
» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有201人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 处理高通量测序数据时遇到几个问题，请高手帮忙解答
已经有0人回复
- 关于测序后基因分型的一些问题。。。求大神解答！
已经有2人回复
- 关于基因家族的几个问题
已经有0人回复
- 关于微生物基因组的几个问题
已经有0人回复
- 高通量测序问题求助.
已经有1人回复
- 关于基因测序问题
已经有4人回复
- 关于基因组计划的几个简单问题
已经有1人回复
- 请教关于基因全长的问题
已经有3人回复
- 关于基因组、测序方案的问题
已经有0人回复
- 测序结果峰图观测的问题
已经有7人回复
- 关于用phusion高保真DNA聚合酶来对DNA测序的问题
已经有0人回复
- 关于454测序的一些问题
已经有0人回复
- 关于载体的问题
已经有1人回复
- 求助，关于测序峰值图全是乱峰和套峰的几个问题
已经有2人回复
- 【求助/交流】求助：关于均一化cDNA文库构建和转录组测序的问题
已经有1人回复
- 【求助/交流】关于测序的问题
已经有3人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
澳大利亚科廷大学招收全奖博士（采矿与冶金工程专业）
+1/281
-
山东征女友，坐标济南
+1/147
-
【最后机会】深圳大学2026级土木工程博士急招
+5/95
-
重庆大学李延军课题组招聘有机/药化方向青年教师、博士后和研究助理数名
+1/90
-
USTS化生学院蒋老师课题组招收研究生
+1/88
-
【全奖博士招生】美国科罗拉多大学科罗拉多斯普林斯分校----固体与结构力学
+1/84
-
吉林师范大学宽禁带半导体材料生长与器件实验室招收2026年入学申请考核制博士生4名
+2/50
-
哈尔滨工业大学博士招生
+1/37
-
中国科大-合肥国家实验室冷原子量子中继团队招聘启事
+2/26
-
电子科技大学可持续发展未来技术创新中心（材料、生物医学工程及相关研究方向）诚聘教
+1/20
-
深圳90理工男找FOR女
+1/18
-
26年启明计划
+1/17
-
电子科技大学材料学院可持续发展未来技术创新中心招收博士生及科研助理
+1/14
-
诚邀有志之士加入江苏大学环境学院合成生物学课题组！(长期接收学硕专硕、硕博连读)
+1/7
-
中国科学院金属研究所何杰团队招收2026年9月入学博士生（具有铝合金研究经验者优先）
+1/6
-
杨亚研究员课题组（广西大学-纳米能源研究中心）招收2026年物理学专业学术型博士
+1/6
-
【2026年】【材料力学方向】中科院力学所招1名硕士
+1/4
-
上海交通大学化学化工学院张智涛课题组诚聘博士后
+1/3
-
PostDoc fellowship: Video-Based 3D Human Kinematics Extraction/Pose Esitimation!
+1/2
-
新加坡南洋理工大学- 光电/ 智能传感/ 脑机接口方向 博士后
+1/1
gyesang
荣誉版主 (著名写手)
-
专家经验: +24 - MolEPI: 31
- 应助: 599 (博士)
- 贵宾: 2.689
- 金币: 24334.9
- 帖子: 2327
- 在线: 623.1小时
- 虫号: 849017
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
1，两端的测序引物似乎是公司提供的存在于载体上的引物？这是不是意味着序列的两端都是可信的，不存在引物后面一段测不准的情况呢 你学姐说的是对的，一般双脱氧测序可以测1000bp 左右，前600-800bp 是准确的，后面的序列如果出现突变不一定真的是突变，也可能是测序的原因造成的。同时，测序时，引物结合位置处的后面约50碱基左右也是不准的，所以一般不用基因特异引物测序，而在载体上设计引物测序 2，同上，如果两端的引物是在载体上，我当初扩增这段序列用的引物（还加上了保护碱基和酶切位点）就没用啦？ 对于测序来说，用不上，载体上有通用引物，就用通用引物测序 3，那我大概需要新设计几个测序引物呢？位置在哪里比较合适哦 你需要再设计一条引物测序就够了，位置在约650bp处设计，加上载体的正反向通用引物，做3个测序反应够了，可以测通 刚从实验室出来，晚上想问问公司的人明天回去再和学姐多交流下，现在坐在通勤上脑袋有点晕，希望大家能帮我理一下思路。。。 补充:看了下测序公司的引物，两端分别是T7和T3。那个这俩我在数据库上看到，他们被标为promoter啊，数据库里有其他的比如M13都被标为primer.这是这俩能够当引物用的意思吗？ 这两个可以当通用引物，T7 的序列是特定的 发自小木虫IOS客户端 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
梦幻在玩18楼2017-01-15 04:00:51
19楼2017-01-15 08:58:08
20楼2017-01-15 10:32:28
21楼2017-01-15 10:32:48
22楼2017-01-15 10:34:36
简单回复
chentao2楼
2017-01-14 18:27
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
chentao3楼
2017-01-14 18:27
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
qdbeer4楼
2017-01-14 18:28
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
1
qdbeer5楼
2017-01-14 18:28
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
1
tableman6楼
2017-01-14 18:32
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
tableman7楼
2017-01-14 18:32
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
假大空8楼
2017-01-14 18:32
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
顶
time889楼
2017-01-14 18:38
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
time8810楼
2017-01-14 18:38
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
超级老快11楼
2017-01-14 18:42
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
l65124012楼
2017-01-14 18:56
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
顶 发自小木虫Android客户端
tan91413楼
2017-01-14 18:58
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
tan91414楼
2017-01-14 18:58
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
tzynew15楼
2017-01-14 19:12
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
nono200916楼
2017-01-14 19:58
回复
梦幻在玩(金币+2): 谢谢参与
·
dsctg17楼
2017-01-14 20:20
回复
小兔11123楼
2017-01-15 10:54
回复