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zhao_student

新虫 (小有名气)

[交流] 基因组模版做PCR 已有6人参与

请问以植物基因组为模版做PCR,没有条带怎么解释?用cDNA做模版没有问题啊!

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lichengpu

新虫 (著名写手)

xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-07 07:40:50
是不是太大了

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2楼2016-09-07 06:32:44
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010308Jing

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-07 07:40:55
蛋白有好几个isoform ,反转录出来有可能会只有一个或者几个,不是全部,你看看是不是表达量多的

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3楼2016-09-07 07:15:17
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xrxleisure

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有可能片段较大,所用的酶不适合
4楼2016-09-07 09:10:07
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更恋秋风

铁杆木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
第一步时间延长至15min

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5楼2016-09-07 09:39:49
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tayifeita

木虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-09-10 22:35:41
和你的试剂操作什么没有任何问题,因为你的cDNA可以扩出来。cDNA和基因组唯一区别就是一个无内含子,一个有内含子。所以有两原因,一是你设计的引物是跨外显子,二是你设计的引物有错配。

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6楼2016-09-07 09:47:11
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zhao_student

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lichengpu at 2016-09-07 06:32:44
是不是太大了

cDNA上P出来基本都是1kb以下。

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7楼2016-09-07 10:19:19
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zhao_student

新虫 (小有名气)

可是我做的是未知蛋白啊,要怎么查啊?

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8楼2016-09-07 10:22:01
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zhao_student

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xrxleisure at 2016-09-07 09:10:07
有可能片段较大,所用的酶不适合

cDNA上P出来大小都在1kb以下啊

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9楼2016-09-07 10:22:49
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zhao_student

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 010308Jing at 2016-09-07 07:15:17
蛋白有好几个isoform ,反转录出来有可能会只有一个或者几个,不是全部,你看看是不是表达量多的

可是我做的是未知蛋白,要怎么查啊?

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10楼2016-09-07 10:23:33
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