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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 基因组模版做PCR
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zhao_student

新虫 (小有名气)

[交流] 基因组模版做PCR 已有6人参与

请问以植物基因组为模版做PCR，没有条带怎么解释？用cDNA做模版没有问题啊！

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1楼 2016-09-07 05:28:39
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lichengpu

新虫 (著名写手)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-07 07:40:50
是不是太大了

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2楼2016-09-07 06:32:44
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010308Jing

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-07 07:40:55
蛋白有好几个isoform ，反转录出来有可能会只有一个或者几个，不是全部，你看看是不是表达量多的

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3楼2016-09-07 07:15:17
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xrxleisure

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
有可能片段较大，所用的酶不适合
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4楼2016-09-07 09:10:07
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更恋秋风

铁杆木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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5楼2016-09-07 09:39:49
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tayifeita

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-09-10 22:35:41
和你的试剂操作什么没有任何问题，因为你的cDNA可以扩出来。cDNA和基因组唯一区别就是一个无内含子，一个有内含子。所以有两原因，一是你设计的引物是跨外显子，二是你设计的引物有错配。

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6楼2016-09-07 09:47:11
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zhao_student

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lichengpu at 2016-09-07 06:32:44
是不是太大了

cDNA上P出来基本都是1kb以下。

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7楼2016-09-07 10:19:19
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zhao_student

新虫 (小有名气)
可是我做的是未知蛋白啊，要怎么查啊？

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8楼2016-09-07 10:22:01
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zhao_student

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xrxleisure at 2016-09-07 09:10:07
有可能片段较大，所用的酶不适合

cDNA上P出来大小都在1kb以下啊

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9楼2016-09-07 10:22:49
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zhao_student

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 010308Jing at 2016-09-07 07:15:17
蛋白有好几个isoform ，反转录出来有可能会只有一个或者几个，不是全部，你看看是不是表达量多的

可是我做的是未知蛋白，要怎么查啊？

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10楼2016-09-07 10:23:33
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