5楼: Originally posted by 更恋秋风 at 2016-09-07 09:39:49
第一步时间延长至15min

6楼: Originally posted by tayifeita at 2016-09-07 09:47:11
和你的试剂操作什么没有任何问题，因为你的cDNA可以扩出来。cDNA和基因组唯一区别就是一个无内含子，一个有内含子。所以有两原因，一是你设计的引物是跨外显子，二是你设计的引物有错配。
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12楼: Originally posted by zhao_student at 2016-09-07 10:24:55
我是根据cDNA设计的引物，那怎么避免这两种情况啊？
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13楼: Originally posted by tayifeita at 2016-09-07 10:35:46
你把你要扩的片段和基因组序列blast上比对，在graphic上看，直接在上面下序列重新设计
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14楼: Originally posted by zhao_student at 2016-09-07 10:38:52
还有别的方法吗？我没有基因组测序。
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15楼: Originally posted by tayifeita at 2016-09-07 10:54:26
那就直接把cdna序列去blast
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16楼: Originally posted by zhao_student at 2016-09-07 10:55:31
详细点的呢？
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17楼: Originally posted by tayifeita at 2016-09-07 11:14:04
一两句说不清，你可以问下你实验室的小伙伴们吧，你只要知道你那个植株的种属还有cDna序列，这个是很容易用blast解决的事情。
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18楼: Originally posted by zhao_student at 2016-09-07 11:17:58
我大概知道什么情况了，实验室就我自己在做这些，没人用过。。谢啦！
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19楼: Originally posted by tayifeita at 2016-09-07 11:19:20
恩，如果确实是我说的问题，麻烦请反馈一下哈，不是的话也请反馈一下，谢谢啦
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