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zhao_student

新虫 (小有名气)

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5楼: Originally posted by 更恋秋风 at 2016-09-07 09:39:49
第一步时间延长至15min

要P的序列没有那么长

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11楼2016-09-07 10:24:05
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zhao_student

新虫 (小有名气)

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6楼: Originally posted by tayifeita at 2016-09-07 09:47:11
和你的试剂操作什么没有任何问题,因为你的cDNA可以扩出来。cDNA和基因组唯一区别就是一个无内含子,一个有内含子。所以有两原因,一是你设计的引物是跨外显子,二是你设计的引物有错配。
...

我是根据cDNA设计的引物,那怎么避免这两种情况啊?

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12楼2016-09-07 10:24:55
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tayifeita

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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12楼: Originally posted by zhao_student at 2016-09-07 10:24:55
我是根据cDNA设计的引物,那怎么避免这两种情况啊?
...

你把你要扩的片段和基因组序列blast上比对,在graphic上看,直接在上面下序列重新设计

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13楼2016-09-07 10:35:46
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zhao_student

新虫 (小有名气)

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13楼: Originally posted by tayifeita at 2016-09-07 10:35:46
你把你要扩的片段和基因组序列blast上比对,在graphic上看,直接在上面下序列重新设计
...

还有别的方法吗?我没有基因组测序。

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14楼2016-09-07 10:38:52
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tayifeita

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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14楼: Originally posted by zhao_student at 2016-09-07 10:38:52
还有别的方法吗?我没有基因组测序。
...

那就直接把cdna序列去blast

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15楼2016-09-07 10:54:26
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zhao_student

新虫 (小有名气)

引用回帖:
15楼: Originally posted by tayifeita at 2016-09-07 10:54:26
那就直接把cdna序列去blast
...

详细点的呢?

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16楼2016-09-07 10:55:31
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tayifeita

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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16楼: Originally posted by zhao_student at 2016-09-07 10:55:31
详细点的呢?
...

一两句说不清,你可以问下你实验室的小伙伴们吧,你只要知道你那个植株的种属还有cDna序列,这个是很容易用blast解决的事情。

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17楼2016-09-07 11:14:04
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zhao_student

新虫 (小有名气)

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17楼: Originally posted by tayifeita at 2016-09-07 11:14:04
一两句说不清,你可以问下你实验室的小伙伴们吧,你只要知道你那个植株的种属还有cDna序列,这个是很容易用blast解决的事情。
...

我大概知道什么情况了,实验室就我自己在做这些,没人用过。。谢啦!

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18楼2016-09-07 11:17:58
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tayifeita

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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18楼: Originally posted by zhao_student at 2016-09-07 11:17:58
我大概知道什么情况了,实验室就我自己在做这些,没人用过。。谢啦!
...

恩,如果确实是我说的问题,麻烦请反馈一下哈,不是的话也请反馈一下,谢谢啦

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19楼2016-09-07 11:19:20
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zhao_student

新虫 (小有名气)

引用回帖:
19楼: Originally posted by tayifeita at 2016-09-07 11:19:20
恩,如果确实是我说的问题,麻烦请反馈一下哈,不是的话也请反馈一下,谢谢啦
...

那就先互相关注一下喽。。

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20楼2016-09-07 11:20:01
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