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18253592055

金虫 (正式写手)

[交流] western blot 问题

最近在做一个基因,WB检测表达量,我们是用片子曝光,每次化学发光的时候有特异型带,没有杂带,但是整张膜的背景很高,最近做了几次都是这种情况,刚开始以为是封闭时间太短,由封闭一小时变成了两小时(5%牛奶封闭),但是结果还是一样背景很高,导致有些带看的不是很清楚,同一张膜孵其他抗体就不会出现这种情况,我觉得可能是抗体出现的问题(抗体是用PBST配的),大家有没有碰到过这样的问题,有没有什么解决办法?
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seeker91

木虫 (文坛精英)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用牛奶配抗体会很好,稀释比例再大点,可以降低背景。

发自小木虫Android客户端
11楼2016-08-17 17:19:04
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普通回帖

18253592055(金币+1): 谢谢参与
2楼2016-08-16 22:26:53
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18253592055(金币+1): 谢谢参与
3楼2016-08-16 22:29:54
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RiqiangBao

新虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-17 08:34:12
欸?抗体不是用脱脂牛奶配的嘛?

发自小木虫Android客户端
4楼2016-08-16 23:26:47
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18253592055

金虫 (正式写手)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-17 08:34:20
引用回帖:
4楼: Originally posted by RiqiangBao at 2016-08-16 23:26:47
欸?抗体不是用脱脂牛奶配的嘛?

有用脱脂奶粉,还有用bsa,我们实验室用pbst

发自小木虫IOS客户端
5楼2016-08-17 00:08:02
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祝福
6楼2016-08-17 00:25:47
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RiqiangBao

新虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-17 08:34:30
引用回帖:
5楼: Originally posted by 18253592055 at 2016-08-17 00:08:02
有用脱脂奶粉,还有用bsa,我们实验室用pbst
...

你要不试试牛奶??

发自小木虫Android客户端
7楼2016-08-17 01:13:54
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8楼2016-08-17 02:10:19
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achonghello

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
多洗几次  时间久一点
9楼2016-08-17 16:58:39
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star013

新虫 (知名作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们可以做wb技术服务

发自小木虫Android客户端
10楼2016-08-17 17:14:59
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