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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » western blot 问题
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seeker91

木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用牛奶配抗体会很好，稀释比例再大点，可以降低背景。

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11楼2016-08-17 17:19:04
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ljsrzc

木虫 (正式写手)

喜欢海贼王喜欢娜美喜欢汉库克
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
膜有没有洗干净？

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在一家试剂公司，买科研产品找我哦q2229097569
12楼2016-08-17 20:37:13
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gendalf

金虫 (著名写手)
楼主，抗体是用脱脂奶粉或BSA的诶

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13楼2016-08-17 20:42:32
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18253592055

金虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by seeker91 at 2016-08-17 17:19:04
用牛奶配抗体会很好，稀释比例再大点，可以降低背景。

我也是查到可能是抗体浓度太多高导致的，不知道是不是，最近在做一次看看，谢谢

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14楼2016-08-17 23:59:16
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jqsce59
祝福
15楼2016-08-18 03:44:03
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梦想的守望者

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们实验室       
孵一抗
1)洗膜：TBST液洗3次/8min
2)5% BSA:              (0.5g BSA+10ml TBST)
抗体：5%BSA=1:1000  (5ul抗体+5ml BSA)   
正面朝下
3)4℃过夜，第二天早上翻面，过两个小时。
孵二抗
1)洗膜：TBST液洗3次/8min
2) 5%脱脂奶粉:          (0.5g脱脂奶粉+10ml TBST)
二抗：5%脱脂奶粉=1:5000 (2ul二抗+10ml 5%脱脂奶粉)
你可以参考一下
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坚持
16楼2016-08-18 09:30:07
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vanchy

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
封闭液用百分之五BSA试一下

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17楼2016-08-18 12:47:29
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wer342342
18楼2016-08-18 13:03:08
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酱油豆

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
背景高，试试降低显色时间，看到目标条带就定影！

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19楼2016-08-18 23:13:55
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18253592055

金虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 梦想的守望者 at 2016-08-18 09:30:07
我们实验室       
孵一抗
1)洗膜：TBST液洗3次/8min
2)5% BSA:              (0.5g BSA+10ml TBST)
抗体：5%BSA=1:1000  (5ul抗体+5ml BSA)   
正面朝下
3)4℃过夜，第二天早上翻面，过两个小时。
孵二抗
1)洗膜 ...

谢谢

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20楼2016-08-19 00:18:07
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