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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » western blot 问题
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18253592055

金虫 (正式写手)

[交流] western blot 问题

最近在做一个基因，WB检测表达量，我们是用片子曝光，每次化学发光的时候有特异型带，没有杂带，但是整张膜的背景很高，最近做了几次都是这种情况，刚开始以为是封闭时间太短，由封闭一小时变成了两小时（5%牛奶封闭），但是结果还是一样背景很高，导致有些带看的不是很清楚，同一张膜孵其他抗体就不会出现这种情况，我觉得可能是抗体出现的问题（抗体是用PBST配的），大家有没有碰到过这样的问题，有没有什么解决办法？
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1楼 2016-08-16 22:23:10
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

seeker91

木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用牛奶配抗体会很好，稀释比例再大点，可以降低背景。

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11楼2016-08-17 17:19:04
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普通回帖

leic
★
18253592055(金币+1): 谢谢参与
2楼2016-08-16 22:26:53
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假大空
★
18253592055(金币+1): 谢谢参与
顶
3楼2016-08-16 22:29:54
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RiqiangBao

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-17 08:34:12
欸？抗体不是用脱脂牛奶配的嘛？

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4楼2016-08-16 23:26:47
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18253592055

金虫 (正式写手)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-17 08:34:20
引用回帖:
4楼: Originally posted by RiqiangBao at 2016-08-16 23:26:47
欸？抗体不是用脱脂牛奶配的嘛？

有用脱脂奶粉，还有用bsa，我们实验室用pbst

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5楼2016-08-17 00:08:02
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vxrcpy084
祝福
6楼2016-08-17 00:25:47
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RiqiangBao

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-17 08:34:30
引用回帖:
5楼: Originally posted by 18253592055 at 2016-08-17 00:08:02
有用脱脂奶粉，还有用bsa，我们实验室用pbst
...

你要不试试牛奶？？

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7楼2016-08-17 01:13:54
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xhmaohan
8楼2016-08-17 02:10:19
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achonghello

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
多洗几次  时间久一点
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9楼2016-08-17 16:58:39
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star013

新虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们可以做wb技术服务

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10楼2016-08-17 17:14:59
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