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RIPA裂解后离心提取蛋白液时出现絮状物已有1人参与
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| 各位，我使用CST RIPA裂解液裂解悬浮细胞，每10的6次方个细胞加20-30ul裂解液，14000g离心后时常出现絮状沉淀，无法将蛋白液顺利吸出。裂解步骤：细胞离心后加入30ul RIPA，使用移液器混匀，立即冻存于-80℃，次日或一周后取出，冰上融化，每隔十分钟 涡 旋 振 荡一次，共进行三次，之后4度14000g离心15min。请大家提出宝贵意见，问题到底出在了哪里，谢谢。 |
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2楼2016-07-18 17:43:02
3楼2016-07-18 18:19:22
baobaoliang
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4楼2016-07-19 22:53:01
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5楼2016-07-21 10:00:49
柳梢月
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- 专业: 有机合成
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加完裂解液裂解完后，可以用1ML注射器反复吹打，这是会有很多泡泡，然后12000转每分钟离心30分钟，你再看就会发现没有絮状物啦，另外10的6次方细胞可以考虑把裂解液加到50微升 发自小木虫Android客户端 |
6楼2016-07-24 21:23:12