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changliz

新虫 (小有名气)

[求助] 多糖的提取过程 已有5人参与

多糖的提取过程中,先用95%乙醇回流提取去脂类?再水提,后用90%乙醇是为什么?有什么用,为啥用乙醇除了一次杂,水提后又用乙醇,且为什么不用95%的乙醇,要用90%?其他浓度的可以吗??

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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
changliz: 金币+5, ★有帮助 2016-07-01 22:16:57
95乙醇,或者乙醇,会将很多黄酮,甾体等成分提取出来,每种多糖要根据其自身性质,设计合适的提取工艺。不过大多数都是75左右的提取。
另外除去脂类,一般用正己烷或者石油醚。
能不能提取出来,要看实际实验。
2楼2016-06-30 13:27:52
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普通回帖

qingxiayuan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
changliz: 金币+5 2016-07-01 22:17:05
95%乙醇回流是为了去除脂类,还有一些色素,小分子物质。后面水提之后再用乙醇是为了醇沉。至于乙醇浓度,个人觉得都可以。终浓度从15%左右至90%左右都能醇沉出多糖,看你目的。一般终浓度为75%。考察分级醇沉可以用不同的醇沉终浓度。
3楼2016-06-30 15:37:22
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changliz

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by qingxiayuan at 2016-06-30 15:37:22
95%乙醇回流是为了去除脂类,还有一些色素,小分子物质。后面水提之后再用乙醇是为了醇沉。至于乙醇浓度,个人觉得都可以。终浓度从15%左右至90%左右都能醇沉出多糖,看你目的。一般终浓度为75%。考察分级醇沉可以 ...

水提的时候所加的蒸馏水多少,考虑到溶胀的问题,不明白蒸馏水到底加多少,如根,茎,叶中的多糖的水提
4楼2016-07-01 22:22:02
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weiwokaoyan

银虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zinfly at 2016-06-30 13:27:52
95乙醇,或者乙醇,会将很多黄酮,甾体等成分提取出来,每种多糖要根据其自身性质,设计合适的提取工艺。不过大多数都是75左右的提取。
另外除去脂类,一般用正己烷或者石油醚。
能不能提取出来,要看实际实验。

请问乙醇沉完多糖以后,用丙酮、无水乙醇洗涤几次,怎么操作啊?直接加入向沉淀多糖加入丙酮或者无水乙醇搅拌离心或者抽滤吗?谢谢
5楼2016-07-02 09:34:14
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风竹林

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by weiwokaoyan at 2016-07-02 09:34:14
请问乙醇沉完多糖以后,用丙酮、无水乙醇洗涤几次,怎么操作啊?直接加入向沉淀多糖加入丙酮或者无水乙醇搅拌离心或者抽滤吗?谢谢...

我也在做这个,洗涤时有看到用滤纸外加滤布过滤的,也有加入无水乙醇或丙酮后离心的方法,我用的是前者

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6楼2016-07-03 17:53:45
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weiwokaoyan

银虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 风竹林 at 2016-07-03 17:53:45
我也在做这个,洗涤时有看到用滤纸外加滤布过滤的,也有加入无水乙醇或丙酮后离心的方法,我用的是前者
...

洗涤后有什么变化吗?,亲
7楼2016-07-03 18:44:59
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lichangjun

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

多糖不溶于乙醇,所以在GB1676-2008里面就有,首先是采用80%乙醇洗涤然后涡旋振荡在超声30min,之后经水浴锅沸水浴2h,在定容离心去上清液。这时候在加乙醇就能将多糖析出来,不过我们一搬还是采用80%乙醇来做醇沉。
8楼2016-07-06 08:23:50
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MorsThanatos

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

两步用的乙醇作用是不一样的,第一次用乙醇是为了出去脂类和其他杂质,水提后用乙醇是用来分离多糖的,多糖不溶于乙醇,其他物质溶于乙醇,但是一般都用的是3倍体积95%乙醇醇沉,算下来大概70%的浓度。
9楼2016-07-06 16:16:45
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倾雨晨

木虫 (著名写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by MorsThanatos at 2016-07-06 16:16:45
两步用的乙醇作用是不一样的,第一次用乙醇是为了出去脂类和其他杂质,水提后用乙醇是用来分离多糖的,多糖不溶于乙醇,其他物质溶于乙醇,但是一般都用的是3倍体积95%乙醇醇沉,算下来大概70%的浓度。

您好,没明白您最后一句是什么意思?95的乙醇怎么相当于70的呢?求帅哥给予解答,谢谢

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10楼2016-11-12 09:24:46
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