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redwinexo

金虫 (小有名气)

[求助] 多糖提取醇沉后溶液上层出现大块絮状物不知为何物 已有9人参与

请做过多糖提取的大侠指点迷津:本人提取多糖过程出现两个棘手的问题:①醇沉工序,加乙醇于水提清液(离心获取)中后清液上层出现白色絮状物,不知道此絮状物为何物?②醇沉液于4℃过夜保存后,4000g*20min离心条件下得不到醇沉物,甚是奇怪!醇沉物仍然悬浮在溶剂中,手感可触及有典型多糖的滑腻感?

多糖提取醇沉后溶液上层出现大块絮状物不知为何物
清液上层出现白色絮状物图1.jpg


多糖提取醇沉后溶液上层出现大块絮状物不知为何物-1
清液上层出现白色絮状物图2.jpg
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99503102

版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
redwinexo: 金币+2, 有帮助 2014-10-14 16:35:35
以前做过果汁的果胶定性实验,方法就是加醇沉淀,所以你问的这个絮状物应该就是你的多糖吧。离心得不到醇沉物是因为你的离心力不够大,要么加大离心力,要么延长离心时间,这是比较简单的解决方法。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
微信公众号:食安小屋
2楼2014-10-14 00:25:31
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luanyanlu

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
redwinexo: 金币+1, 有帮助 2014-10-14 16:32:44
看状态好像是果胶。不知是从什么原料里用什么条件提取的?
3楼2014-10-14 15:45:57
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redwinexo

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by luanyanlu at 2014-10-14 15:45:57
看状态好像是果胶。不知是从什么原料里用什么条件提取的?

黄秋葵
4楼2014-10-14 16:28:49
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redwinexo

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 99503102 at 2014-10-14 00:25:31
以前做过果汁的果胶定性实验,方法就是加醇沉淀,所以你问的这个絮状物应该就是你的多糖吧。离心得不到醇沉物是因为你的离心力不够大,要么加大离心力,要么延长离心时间,这是比较简单的解决方法。
...

絮状物是果胶多糖的话,下层液也是很黏的溶液,下层液里面也应该富含多糖才对呀?是不是上层的是果胶,下层沉降的是其他多糖?另外多大的离心条件更适合?
5楼2014-10-14 16:35:26
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renwei9612

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是与下层多糖不一样的多糖,我醇沉是用10000g,20min,你4000会不会离心力小啊?醇沉前有这个东西吗?你把这个飘着的东西单拿出来看是否水溶,如果水溶那就应该是多糖,再不确定可以水溶后苯酚硫酸法测一下嘛
求大神指导~
6楼2014-10-14 17:01:01
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99503102

版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by redwinexo at 2014-10-14 16:35:26
絮状物是果胶多糖的话,下层液也是很黏的溶液,下层液里面也应该富含多糖才对呀?是不是上层的是果胶,下层沉降的是其他多糖?另外多大的离心条件更适合?...

这个不好判断是不是果胶,因为多糖的形式不止果胶一种。离心机我选的是小型的,你这个4000的估计是大离心机,我以前做的转速都上万的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
微信公众号:食安小屋
7楼2014-10-14 17:29:01
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f61645215

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
4000g太小了 你可以试试8000g 离心半小时
8楼2014-10-14 18:56:06
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redwinexo

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by renwei9612 at 2014-10-14 17:01:01
应该是与下层多糖不一样的多糖,我醇沉是用10000g,20min,你4000会不会离心力小啊?醇沉前有这个东西吗?你把这个飘着的东西单拿出来看是否水溶,如果水溶那就应该是多糖,再不确定可以水溶后苯酚硫酸法测一下嘛

醇沉前无此白色絮状物,醇沉前是离心水提液所获得的上清液,乙醇一加进去,立刻就出现此白色絮凝物。看来得提高离心力和时间试试!多谢!
9楼2014-10-14 19:18:59
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luanyanlu

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by redwinexo at 2014-10-14 16:28:49
黄秋葵...

你要的多糖分子量多少?之前提取果胶果胶,分子量大醇沉出来是絮状物,分子量小的沉出来是细碎颗粒。
10楼2014-10-15 09:31:53
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