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redwinexo

金虫 (小有名气)

[求助] 多糖提取醇沉后溶液上层出现大块絮状物不知为何物 已有9人参与

请做过多糖提取的大侠指点迷津:本人提取多糖过程出现两个棘手的问题:①醇沉工序,加乙醇于水提清液(离心获取)中后清液上层出现白色絮状物,不知道此絮状物为何物?②醇沉液于4℃过夜保存后,4000g*20min离心条件下得不到醇沉物,甚是奇怪!醇沉物仍然悬浮在溶剂中,手感可触及有典型多糖的滑腻感?

多糖提取醇沉后溶液上层出现大块絮状物不知为何物
清液上层出现白色絮状物图1.jpg


多糖提取醇沉后溶液上层出现大块絮状物不知为何物-1
清液上层出现白色絮状物图2.jpg
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redwinexo

金虫 (小有名气)

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3楼: Originally posted by luanyanlu at 2014-10-14 15:45:57
看状态好像是果胶。不知是从什么原料里用什么条件提取的?

黄秋葵
4楼2014-10-14 16:28:49
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redwinexo

金虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by 99503102 at 2014-10-14 00:25:31
以前做过果汁的果胶定性实验,方法就是加醇沉淀,所以你问的这个絮状物应该就是你的多糖吧。离心得不到醇沉物是因为你的离心力不够大,要么加大离心力,要么延长离心时间,这是比较简单的解决方法。
...

絮状物是果胶多糖的话,下层液也是很黏的溶液,下层液里面也应该富含多糖才对呀?是不是上层的是果胶,下层沉降的是其他多糖?另外多大的离心条件更适合?
5楼2014-10-14 16:35:26
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redwinexo

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by renwei9612 at 2014-10-14 17:01:01
应该是与下层多糖不一样的多糖,我醇沉是用10000g,20min,你4000会不会离心力小啊?醇沉前有这个东西吗?你把这个飘着的东西单拿出来看是否水溶,如果水溶那就应该是多糖,再不确定可以水溶后苯酚硫酸法测一下嘛

醇沉前无此白色絮状物,醇沉前是离心水提液所获得的上清液,乙醇一加进去,立刻就出现此白色絮凝物。看来得提高离心力和时间试试!多谢!
9楼2014-10-14 19:18:59
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redwinexo

金虫 (小有名气)

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11楼: Originally posted by jiaruirui at 2014-10-15 15:41:12
醇沉后絮状物有的上浮有的下沉,可能是分子量不同造成的,上浮的是分子量较低的多糖,下沉的可能是聚合度高的大分子多糖,果胶醇沉时是浮在上面的。离心得不到沉淀,可以加大转速,还可以用纱布过滤,纱布过滤很容易 ...

我这个多糖用纱布过滤的时候发现很多穿过纱布孔重新回到了过滤液里面(120目的纱布),纱布过滤和抽滤效果都不是很好
12楼2014-10-15 22:50:28
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