24小时热门版块排行榜    

查看: 5516  |  回复: 7

清草XC

金虫 (正式写手)

[交流] RNA提取之后琼脂糖电泳发现条带很暗这是什么原因?

如题所示,跑出来的条带如图所示:请各位大神帮忙解析,谢谢啦

RNA提取之后琼脂糖电泳发现条带很暗这是什么原因?
2016-4-24.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
清草XC: 金币+3 2016-05-05 18:04:14
.................嗯

1) 聚焦不清
2) 亮暗和浓度有关,觉得暗就提高曝光程度
3) RNA电泳看的是三条带之间的比对也就是完整性,非要比分子量上的也是RNA Marker而不是DNA Marker

个人看法,有问题请指正
Let God do with it as He wills
2楼2016-05-05 13:05:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清草XC

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2016-05-05 13:05:50
.................嗯

1) 聚焦不清
2) 亮暗和浓度有关,觉得暗就提高曝光程度
3) RNA电泳看的是三条带之间的比对也就是完整性,非要比分子量上的也是RNA Marker而不是DNA Marker

个人看法,有问题请指正

非常感谢!同样的条件有的提的浓度高有的低,实验过程都一样,真不知道问题出现在哪里了
3楼2016-05-05 18:04:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

z631535213

木虫 (正式写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
mark,等楼主问题解决。之前我也碰到过这个问题,当时初步考虑应该是PCR过程中某因素造成的

发自小木虫IOS客户端
4楼2016-05-05 20:26:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

娟恋幸福

新虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是不是拍照的时候亮度没调好

发自小木虫Android客户端
5楼2016-05-05 23:48:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackyoung

新虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
清草XC: 金币+3 2016-06-06 10:35:20
没有啥问题,RNA是单链,与小沟结合染料结合能力逊于DNA,所以同等条件下亮度会弱。看你的胶图,28S 18S rRNA条带完整清晰,完整性没有问题。图上有两条特别暗的区域,应该是指示剂造成的,loading buffer可以少加一些。

发自小木虫Android客户端
CestLaVie
6楼2016-05-09 23:47:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清草XC

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by jackyoung at 2016-05-09 23:47:32
没有啥问题,RNA是单链,与小沟结合染料结合能力逊于DNA,所以同等条件下亮度会弱。看你的胶图,28S 18S rRNA条带完整清晰,完整性没有问题。图上有两条特别暗的区域,应该是指示剂造成的,loading buffer可以少加一 ...

可是我们测出来的RNA的含量很低,这是什么原因呢,从5×106细胞中提取RNA,一般能获得多少ug的RNA呢?
7楼2016-06-06 10:37:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackyoung

新虫 (正式写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 清草XC at 2016-06-06 10:37:33
可是我们测出来的RNA的含量很低,这是什么原因呢,从5×106细胞中提取RNA,一般能获得多少ug的RNA呢?...

测定的时候智能一点儿的分光光度计都会去除本底,然后再按公式换算,这就造成了有杂质污染的样品测定不准确(这种污染不一定能反映在电泳图上),所以要综合采用多种手段看结果。

发自小木虫Android客户端
CestLaVie
8楼2016-06-06 22:48:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 清草XC 的主题更新
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 23/1150 2026-11-07 06:49 by Equinoxhua
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +10 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 17:18 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 7/350 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 8/400 2026-11-06 16:34 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 10/500 2026-11-06 12:32 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 09:01 by 2lRNluKrJpwL
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 12/600 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:11 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
信息提示
请填处理意见