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836277455

新虫 (初入文坛)


[交流] 质粒双酶切切不开

pBARGPE1质粒(5518bp)双酶切总是切不开分别单酶切后发现其中一个酶把质粒线性化了,而另一个酶切过后电泳条带介于对照质粒与线性化质粒条带之间,这是什么问题呢求大神指点

质粒双酶切切不开


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54如来哥哥

新虫 (正式写手)



836277455(金币+2): 谢谢参与
4楼2016-03-30 21:37:24
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harry007

新虫 (小有名气)



836277455(金币+2): 谢谢参与
双酶切用的buffer对不对?确定好要不要加bsa跟dtt?
配的琼脂汤浓度是多少?要切下来的条带大小多大?条带小的话胶浓度低了不容易看清

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5楼2016-03-30 22:03:47
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粒粒分明

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是不是酶切位点有问题呢?检查一下

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12楼2016-03-30 23:48:50
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836277455

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
5楼: Originally posted by harry007 at 2016-03-30 22:03:47
双酶切用的buffer对不对?确定好要不要加bsa跟dtt?
配的琼脂汤浓度是多少?要切下来的条带大小多大?条带小的话胶浓度低了不容易看清

用的NEB的酶,Cutsmart是通用buffer

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13楼2016-03-31 16:31:49
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2016-03-30 21:37   回复  
836277455(金币+2): 谢谢参与
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2016-03-30 21:37   回复  
836277455(金币+2): 谢谢参与
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