| 查看: 1795 | 回复: 15 | ||
[求助]
求助 质粒诱导原核表达总是不成功！已有2人参与
|
|
我把已经构建好的载体转入BL21感受态里后，加入IPTG诱导原核表达，然后跑PAGE发现 无论上清还是包含体內都没有想要的蛋白。 目前鉴定过转入BL21后挑单克隆的菌液，是正确的。也看过测序结果，并没有移码，不知道怎么办了，求教大神！！毕业困难 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
之前让一硕士生水了7个发明专利，现在这7个获批发明专利的维护费可从哪儿支出哈？
已经有9人回复
-
心脉受损
已经有6人回复
-
博士申请都是内定的吗？
已经有8人回复
-
博士读完未来一定会好吗
已经有32人回复
-
读博
已经有5人回复
-
投稿精细化工
已经有4人回复
-
高职单位投计算机相关的北核或SCI四区期刊推荐，求支招！
已经有4人回复
-
导师想让我从独立一作变成了共一第一
已经有9人回复
-
Springer期刊投稿求助
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
SDS-PAGE蛋白表达
已经有13人回复- 我的原核表达，蛋白胶没有蛋白，求助，谢谢
已经有10人回复
- 用LB培养BL21(DE3)菌体总是死亡，求助！
已经有16人回复
- 求助：两种蛋白融合原核表达的问题
已经有15人回复
- 求助原核载体
已经有0人回复
- 【求助/交流】你知道这些蛋白表达的问题吗？
已经有3人回复
- 【原创】求助置换原核表达质粒置换遵循的原理，
已经有0人回复
- 【求助/交流】原核pET系统低温诱导表达菌体浓度太小怎么办？
已经有7人回复
2楼2016-03-29 09:01:24
3楼2016-03-29 16:04:43
4楼2016-03-29 16:16:28
小小细胞啊
新虫 (小有名气)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 1683.9
- 散金: 47
- 红花: 1
- 帖子: 127
- 在线: 81.5小时
- 虫号: 3383316
- 注册: 2014-08-26
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
5楼2016-03-29 19:55:56
| 这个原因有很多种，我也不想一一分析了，说到底还是经验不足啊！但是结果就是蛋白不表达：建议参考资料：原核不表达或表达为什么不在上清：7点几兆的，有点大http://www.detaibio.com/topics/yuan-he-biao-da-faq.html |
6楼2016-03-30 10:19:10
7楼2016-03-30 14:49:39
沉默、颜泪
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3924.8
- 散金: 110
- 红花: 7
- 帖子: 493
- 在线: 104.7小时
- 虫号: 4117547
- 注册: 2015-10-03
- 专业: 白血病
8楼2016-03-31 23:33:15
9楼2016-04-01 02:38:28
10楼2016-04-02 00:47:44