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海绵宝宝123

新虫 (小有名气)

[求助] 皂苷液相条件问题 已有3人参与

又来求助了,我在分皂苷,想进一针看看总样有什么东西,用得是30%乙腈恒冲,加0.1%甲酸,结果都在七分钟内出来了,我把这些接出来点板发现几乎和我的总样一样,请教各位,我该试试什么洗脱条件,而且检测条件波长用多少,我用得是200检测。
还有,在我进样量基本一样的情况下,为什么峰高和峰型差很多,皂苷进样要注意什么。多谢大家,实验遇到瓶颈了,很着急

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qianjungood

金虫 (小有名气)

30%乙腈估计比例大了,刚开始做的时候一般建议用10%到40%乙腈60min,先摸索一下,后面再优化条件,楼上说的没错205nm左右检测较好,峰形影响因素比较多,这个不好说
生如夏花,死如秋叶
7楼2016-03-31 13:55:21
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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品,天然产物分离纯化


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
皂苷一般紫外吸收比较弱,一般紫外会用205nm,大多时候还是用ELSD检测器,从楼主的描述来看,应该是7min的液相方法没有把样品分离开,那你就用乙腈走一个缓梯度来试试,让主峰出峰到15min以后,看看效果怎么样

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2楼2016-03-27 14:32:49
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海绵宝宝123

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 普思生物 at 2016-03-27 14:32:49
皂苷一般紫外吸收比较弱,一般紫外会用205nm,大多时候还是用ELSD检测器,从楼主的描述来看,应该是7min的液相方法没有把样品分离开,那你就用乙腈走一个缓梯度来试试,让主峰出峰到15min以后,看看效果怎么样

多谢,明天试试

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3楼2016-03-27 20:48:22
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海绵宝宝123

新虫 (小有名气)

4楼2016-03-28 09:39:09
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