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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 皂苷液相条件问题
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海绵宝宝123

新虫 (小有名气)

[求助] 皂苷液相条件问题 已有3人参与

又来求助了，我在分皂苷，想进一针看看总样有什么东西，用得是30%乙腈恒冲，加0.1%甲酸，结果都在七分钟内出来了，我把这些接出来点板发现几乎和我的总样一样，请教各位，我该试试什么洗脱条件，而且检测条件波长用多少，我用得是200检测。
还有，在我进样量基本一样的情况下，为什么峰高和峰型差很多，皂苷进样要注意什么。多谢大家，实验遇到瓶颈了，很着急

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1楼 2016-03-27 08:48:18
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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品，天然产物分离纯化

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
皂苷一般紫外吸收比较弱，一般紫外会用205nm，大多时候还是用ELSD检测器，从楼主的描述来看，应该是7min的液相方法没有把样品分离开，那你就用乙腈走一个缓梯度来试试，让主峰出峰到15min以后，看看效果怎么样
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海绵宝宝123
2楼2016-03-27 14:32:49
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海绵宝宝123

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 普思生物 at 2016-03-27 14:32:49
皂苷一般紫外吸收比较弱，一般紫外会用205nm，大多时候还是用ELSD检测器，从楼主的描述来看，应该是7min的液相方法没有把样品分离开，那你就用乙腈走一个缓梯度来试试，让主峰出峰到15min以后，看看效果怎么样

多谢，明天试试

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3楼2016-03-27 20:48:22
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海绵宝宝123

新虫 (小有名气)
什么是缓梯度

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4楼2016-03-28 09:39:09
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红莲劫焰

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你设置一个梯度洗脱条件，从10%乙腈开始，40min加到30%
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5楼2016-03-28 11:58:17
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Swindle

金虫 (小有名气)
我用甲醇和水，和你一样在七分钟内出来。。。老师让我先过个反相柱，再做

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6楼2016-03-29 17:53:20
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qianjungood

金虫 (小有名气)
30%乙腈估计比例大了，刚开始做的时候一般建议用10%到40%乙腈60min，先摸索一下，后面再优化条件，楼上说的没错205nm左右检测较好，峰形影响因素比较多，这个不好说
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生如夏花，死如秋叶
7楼2016-03-31 13:55:21
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cktalan

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽

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海绵宝宝123
8楼2016-03-31 14:01:37
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海绵宝宝123

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by qianjungood at 2016-03-31 13:55:21
30%乙腈估计比例大了，刚开始做的时候一般建议用10%到40%乙腈60min，先摸索一下，后面再优化条件，楼上说的没错205nm左右检测较好，峰形影响因素比较多，这个不好说

用得206检测，且为了让基线稳定，设置了几个梯度恒冲，多谢大家，效果还好

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9楼2016-03-31 23:32:33
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海绵宝宝123

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by cktalan at 2016-03-31 14:01:37
液相条件先不说，可以先用紫外分光光度计扫描确定最佳吸收波长。
赞同楼上各位大牛的说法，皂苷极性还是比较大的，设置梯度洗脱比较好，方便看到总皂苷中成分情况。
祝实验顺利！

谢谢

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10楼2016-03-31 23:32:51
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