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海绵宝宝123

新虫 (小有名气)

[求助] 皂苷液相条件问题 已有3人参与

又来求助了,我在分皂苷,想进一针看看总样有什么东西,用得是30%乙腈恒冲,加0.1%甲酸,结果都在七分钟内出来了,我把这些接出来点板发现几乎和我的总样一样,请教各位,我该试试什么洗脱条件,而且检测条件波长用多少,我用得是200检测。
还有,在我进样量基本一样的情况下,为什么峰高和峰型差很多,皂苷进样要注意什么。多谢大家,实验遇到瓶颈了,很着急

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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品,天然产物分离纯化


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
皂苷一般紫外吸收比较弱,一般紫外会用205nm,大多时候还是用ELSD检测器,从楼主的描述来看,应该是7min的液相方法没有把样品分离开,那你就用乙腈走一个缓梯度来试试,让主峰出峰到15min以后,看看效果怎么样

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2016-03-27 14:32:49
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海绵宝宝123

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 普思生物 at 2016-03-27 14:32:49
皂苷一般紫外吸收比较弱,一般紫外会用205nm,大多时候还是用ELSD检测器,从楼主的描述来看,应该是7min的液相方法没有把样品分离开,那你就用乙腈走一个缓梯度来试试,让主峰出峰到15min以后,看看效果怎么样

多谢,明天试试

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3楼2016-03-27 20:48:22
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海绵宝宝123

新虫 (小有名气)

4楼2016-03-28 09:39:09
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红莲劫焰

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你设置一个梯度洗脱条件,从10%乙腈开始,40min加到30%
5楼2016-03-28 11:58:17
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Swindle

金虫 (小有名气)

我用甲醇和水,和你一样在七分钟内出来。。。老师让我先过个反相柱,再做

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6楼2016-03-29 17:53:20
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qianjungood

金虫 (小有名气)

30%乙腈估计比例大了,刚开始做的时候一般建议用10%到40%乙腈60min,先摸索一下,后面再优化条件,楼上说的没错205nm左右检测较好,峰形影响因素比较多,这个不好说
生如夏花,死如秋叶
7楼2016-03-31 13:55:21
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cktalan

禁虫 (小有名气)

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8楼2016-03-31 14:01:37
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海绵宝宝123

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by qianjungood at 2016-03-31 13:55:21
30%乙腈估计比例大了,刚开始做的时候一般建议用10%到40%乙腈60min,先摸索一下,后面再优化条件,楼上说的没错205nm左右检测较好,峰形影响因素比较多,这个不好说

用得206检测,且为了让基线稳定,设置了几个梯度恒冲,多谢大家,效果还好

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9楼2016-03-31 23:32:33
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海绵宝宝123

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by cktalan at 2016-03-31 14:01:37
液相条件先不说,可以先用紫外分光光度计扫描确定最佳吸收波长。
赞同楼上各位大牛的说法,皂苷极性还是比较大的,设置梯度洗脱比较好,方便看到总皂苷中成分情况。
祝实验顺利!

谢谢

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10楼2016-03-31 23:32:51
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