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大孔树脂相关问题
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咨询大家几个关于大孔树脂的问题： 1.如果我的样品没有完全溶解就上样，是不是起始流动相冲下的流份中就有我没有溶解的样品啊？因为我实验时发现我的流份不是澄清透明的液体，静置后明显看到底部有沉淀的。 2.那我的流份点板，系统氯仿-甲醇-水，10%的流份在紫外下明显有点并且点还很多的，但是显色后点明显减少；30%的紫外下有点，但是拖尾明显，显色后拖尾，都看不到点了。50%，70%，95%这三部分的流份拖尾，看不见点的。希望大家能给点建议。 3.50%，70%这两部分流份在浓缩是起泡很厉害，甚至影响浓缩。这有可能是皂苷成分引起的吗？顺便问一句大家都用什么系统来摸分离皂苷成分的条件。 4.树脂再生的问题。我的大孔树脂过完样品后，有死吸附现象。我用5%盐酸浸泡2小时，水冲至中性，2%NaOH浸泡8小时（一晚上），水洗至中性，发现柱子没有变化，还是很脏。大家有没有跟好的方法，交流一下。 这次问题太多了，希望有经验的大侠们尽量交流，在此先谢谢了。 |
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3楼2011-12-14 18:29:09
4楼2011-12-14 19:13:28
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陈小跳(金币+1):谢谢参与
陈小跳(金币+1):谢谢参与
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1：如果我的样品没有完全溶解就上样，是不是起始流动相冲下的流份中就有我没有溶解的样品啊？因为我实验时发现我的流份不是澄清透明的液体，静置后明显看到底部有沉淀的。 如果你的柱子在跑的过程中没有搅拌或跑干的话不会流下来，但可能会把柱子堵住。你的馏分是浓缩前就有沉淀还是浓缩后，浓缩前可能性不大，除非你底部的棉花没有塞紧，填料漏了。浓缩后的话是由于你样品溶解度不好，在大量流动相中能溶，浓缩后不能溶。 2：我的流份点板，系统氯仿-甲醇-水，10%的流份在紫外下明显有点并且点还很多的，但是显色后点明显减少；30%的紫外下有点，但是拖尾明显，显色后拖尾，都看不到点了。50%，70%，95%这三部分的流份拖尾，看不见点的。希望大家能给点建议。 大空树脂下来的不要抱太大希望看到点，有点反而表明这里面有量很大的东西，分到最后可能你主要的精力都用在把这些量大的成分除去，你只要硅胶－凝胶－反相一步步往下做，点会慢慢出来的。像我做的什么柱子都上完以后还没有点，最后液相前上了一根特别长的硅胶，点还不是很好，最后用制备液相砍完段了才看到很好的点。 3、50%，70%这两部分流份在浓缩是起泡很厉害，甚至影响浓缩。这有可能是皂苷成分引起的吗？顺便问一句大家都用什么系统来摸分离皂苷成分的条件。 只能说可能是皂苷，也有可能是你这部分下来的样品量比较大，浓缩时候也会出现这种情况。分离皂苷一半用硅胶分配柱和ODS。系统一半三相：氯仿：甲醇：水。 4、.树脂再生的问题。我的大孔树脂过完样品后，有死吸附现象。我用5%盐酸浸泡2小时，水冲至中性，2%NaOH浸泡8小时（一晚上），水洗至中性，发现柱子没有变化，还是很脏。大家有没有跟好的方法，交流一下。 树脂如果用在含色素比较多的样品上如叶等，有时候是很难处理回来的，但是如果是同一个植物还可以用一次到两次，但可能效果差点。像实验室做植化树脂一般是一次性的，主要为了避免对其它课题造成污染，就得不偿失了。 |
5楼2011-12-14 19:19:07
6楼2016-07-08 14:02:20
简单回复
2011-12-14 11:07
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陈小跳(金币+1):谢谢参与
祝福