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Katharine3628

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 皂苷类成分制备液相条件摸索的困惑

用制备液相分离皂苷类馏分,205nm下,用分析柱摸条件,75%甲醇(含1%HAc)时是14和15min两个主峰,分离度不太好,降低比例,换成70%甲醇(含1%HAc)后2个小时都不出峰,只出现溶剂峰,用甲醇冲柱可看到样品的峰,进样量也没问题,很困惑。
(PS:流动相、色谱柱、液相都试过了,都是一样的情况,请大家指教)

[ Last edited by Katharine3628 on 2012-8-7 at 01:19 ]
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lhg0209asd

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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leecius: 金币+1, 谢谢参与! 2012-08-07 13:25:57
Katharine3628: 金币+2, 有帮助, 75%和70%甲醇都是分析柱分析的,酸加的是按水相的1%加的 2012-08-11 22:54:27
75%甲醇转换成70%甲醇相差这么大超过了我对制备LC的理解。是不是酸加的有问题。
2楼2012-08-07 08:45:46
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zhoujian6787

铁杆木虫 (著名写手)

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★ ★
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Katharine3628: 金币+2, 有帮助, 嗯 确认了哦 重新配过两次流动相 两台液相和两根色谱柱都试过了滴 2012-08-11 22:55:20
确认你的流动相比例有没有配错哦!
3楼2012-08-07 16:35:21
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xiaoxiao270

至尊木虫 (著名写手)

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★ ★ ★ ★
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karl2100: 金币+1, 3Q 2012-08-08 23:33:54
Katharine3628: 金币+2, ★★★很有帮助, 嗯 用73%的两个峰从15和17min延迟到21和23min 后来用示差检测器测了70%的是27和30min出峰了,十分感谢你的提示 2012-08-12 00:41:27
Katharine3628: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2012-08-12 01:41:16
你就选72%试试呗,一点点往后调。而且你要确定是皂苷,皂苷吸收很低,没准你开始看到的是色素,我们一般用示差检测器
分离、分离
4楼2012-08-07 18:18:59
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bronzezt

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
Katharine3628: 金币+1, 有帮助, 嗯 搜了一下 一般都是文献 是针对某一植物做的哦 都是优化好的条件 和实际遇到的还不太一样 2012-08-12 00:42:36
google 搜索 ‘制备液相分离皂苷’ 会有很多参考
5楼2012-08-08 08:58:16
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lijun005

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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Katharine3628: 金币+2, ★★★很有帮助, 嗯 现在是按水相的1%加的醋酸 分离皂苷适合加碱吗?还真不太清楚哈 三相的也考虑过了 只是不知道一般乙腈-甲醇-水三相条件怎么摸索的呢? 2012-08-12 00:44:27
调调酸碱度,加点弱碱,也可以考虑用三项分
好好学习,天天向上
6楼2012-08-08 18:54:53
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qiaozhong88

新虫 (初入文坛)

也许是酸的浓度稍大。
7楼2012-08-17 17:41:40
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