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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 琼脂糖凝胶电泳缓冲液用TAE和TBE有什么区别吗
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foreverse7en

新虫 (初入文坛)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳缓冲液用TAE和TBE有什么区别吗 已有3人参与

琼脂糖凝胶电泳缓冲液用TAE和TBE有什么区别吗，做的植物DNA，扩增后用哪个缓冲液配胶好一点
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1楼 2016-03-15 17:35:17
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
foreverse7en: 金币+6, ★★★★★最佳答案 2016-03-15 21:42:06
TAE是Tris-乙酸，缓冲容量小，但是溶解度大，易于储存  
TBE是Tris-硼酸，缓冲容量大，但是溶解度小，不易长期储存，易产生沉淀


TAE是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量（TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量），且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%，电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果，此外，回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。TAE的缺点是缓冲容量小，长时间电泳（如过夜）不可选用，除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。

TBE的特点是缓冲能力强，长时间电泳时可选用TBE，并且当用于电泳小于1kb的片段时分离效果更好。TBE用于琼脂糖凝胶时易造成高电渗作用，并且因与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物而使DNA片段的回收率降低，所以不宜在回收电泳中使用。

TAE的配方：
50×TAE Buffer 配制方法：
1。称量Tris 242g，Na2EDTA.2H2O37.2g于1L烧杯中；
2。向烧杯中加入约800ml去离子水，充分搅拌均匀；
3。加入57.1ml的冰乙酸，充分溶解；
4。用NaOH调pH至8.3，加去离子水定容至1L后，室温保存。
使用时稀释50倍或100倍 即1×TAE Buffer 或 0.5×TAE


10×TBE Buffer配制方法：
1。称量氨基丁三醇 108g，Na2EDTA.2H2O 7.44g，硼酸55g 于1L烧杯中；
2。加入约700ml去离子水，搅拌均匀；
3。用NaOH调pH至8.3，加去离子水定容至1L后，室温保存。
使用时稀释10倍 即1×TBE Buffer
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2楼2016-03-15 19:58:39
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foreverse7en

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-03-15 19:58:39
TAE是Tris-乙酸，缓冲容量小，但是溶解度大，易于储存  
TBE是Tris-硼酸，缓冲容量大，但是溶解度小，不易长期储存，易产生沉淀


TAE是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质 ...

用TAE的话每天都要换电泳液吗
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3楼2016-03-16 11:17:15
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卡维斯

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by foreverse7en at 2016-03-16 11:17:15
用TAE的话每天都要换电泳液吗...

跑个四五次电泳就得换，我们有时一天换好几次
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4楼2016-03-16 11:31:41
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a610291425

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by foreverse7en at 2016-03-16 11:17:15
用TAE的话每天都要换电泳液吗...

我们经常跑电泳，差不多一个礼拜换一次TAE
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5楼2016-03-16 11:52:36
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foreverse7en

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by a610291425 at 2016-03-16 11:52:36
我们经常跑电泳，差不多一个礼拜换一次TAE...

点样的时候是不是不能时间太长，是会降解吗
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6楼2016-03-16 18:35:58
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foreverse7en

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by a610291425 at 2016-03-16 11:52:36
我们经常跑电泳，差不多一个礼拜换一次TAE...

点样的时候是不是不能时间太长，是会降解吗
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7楼2016-03-16 18:36:06
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匿名
本帖仅楼主可见
8楼2016-03-16 18:41:40
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西南微生物

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

会，DNA在普通状态下就会自己降解
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月光如水
9楼2016-05-16 12:21:32
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