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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR产物电泳有拖尾，应该怎么改进
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foreverse7en

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR产物电泳有拖尾，应该怎么改进

DNA相同，6个引物，12个点样孔一个引物
植物叶片DNA

DNA50ng/ul 1ul
10*buffer 2ul
dNTP 10mmmol/L 0.25ul
Taq酶 5U/ul 0.2ul
引物 10mmol/L 1ul
20ul体系

94℃3min
94℃1min
55℃±6摄氏度（十二个温度）
72℃2min
35个循环
跑胶跑不好，能帮我分析一下应该怎么改进吗


2016.3.12.RJ3.引物7-12.30分钟.jpg

PCR产物电泳有拖尾，应该怎么改进
2016.3.11.LF3.引物7-12.jpg
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1楼 2016-03-14 17:18:16
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foreverse7en

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
21楼: Originally posted by 会卖萌的滨榔 at 2016-03-15 19:05:42
这个应该是你的温度低，或者DNA降解了，另外就是引物有问题了，建议调高温度试两个，如果还不行换一下引物看看，再不行就重新提DNA吧

DNA提的时候加了TE溶解之后直接放到-20℃吗，还是要放在4℃一点时间再放到-20摄氏度哦
赞一下 回复此楼
22楼2016-03-16 11:12:22
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查看全部 23 个回答

贾子阳009

铜虫 (小有名气)
★
foreverse7en(金币+1): 谢谢参与
PCR没跑过拖尾的

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-03-14 17:57:17
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卡维斯

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
模板有部分降解。你可以把基因组取五微升跑电泳看看是否是有单一条带
赞一下 回复此楼
14楼2016-03-14 18:56:38
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yanyuxiaoxi7楼
2016-03-14 18:04   回复  
foreverse7en(金币+1): 谢谢参与
嗯 发自小木虫Android客户端
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