24小时热门版块排行榜    

查看: 2873  |  回复: 5

雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

[求助] 基因组DNA直接电泳的结果,请问是怎么回事 已有3人参与

各位大侠
      一个月前,我采用的是天根的试剂盒提取的基因组DNA ,保存在-20的冰箱,后做PCR,跑电泳,有目的条带,于是重复方法对余下样品进行上述步骤,结果发现电泳无条带,多次重复也没有条带。再次重复最初样品,也无条带。
      这几天,又重新提取基因组DNA,发生的现象是基因组DNA电泳出现拖尾,PCR样品无条带,求各位指教?是提取的试剂盒的问题,不易于DNA的保存还是PCR出现的额问题,求指教,谢谢!另,我们的样品是干燥过的动物组织,是否不是新鲜的样品也有影响,谢谢

基因组DNA直接电泳的结果,请问是怎么回事
基因组DNA直接电泳,18ul样加2ul loadingbuffer


基因组DNA直接电泳的结果,请问是怎么回事-1
10u了PCR 产物电泳
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

BBMC-2012

木虫 (知名作家)


【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
雨儿天0320: 金币+1, 有帮助 2015-08-26 14:05:05
组织放久了,最好冻起来!不会酒精保存的,最不靠谱!

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-08-19 16:53:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
雨儿天0320: 金币+1, 有帮助 2015-08-26 14:05:13
DNA有降解,但是做模板应该还行,PCR时是不是模板加多了。
3楼2015-08-20 00:10:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangxin2011

捐助贵宾 (小有名气)


【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
雨儿天0320: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-08-26 14:05:25
目测模版加多了,测个浓度,体系中的模版还是别太多。我们这边50ng/ul,1ul就够10微体系
4楼2015-08-20 11:37:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by stone2239 at 2015-08-20 00:10:45
DNA有降解,但是做模板应该还行,PCR时是不是模板加多了。

PCR反应时,模版只加了0.3uL
基因组DNA电泳时,是担心未能提取成功,因此只用了2uL Loading Buffer及18ul 样品
我现在不明白的是基因组DNA直接电泳后出现的这个现象,是由于DNA降解还是因为样品量过多还是因为各种大小的片段掺毒不同造成的,谢谢
5楼2015-08-20 13:34:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by huangxin2011 at 2015-08-20 11:37:37
目测模版加多了,测个浓度,体系中的模版还是别太多。我们这边50ng/ul,1ul就够10微体系

PCR中模版只加了0.3uL,没有现象,是怎么回事呢
6楼2015-08-20 13:35:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 雨儿天0320 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 299求调剂 +4 15188958825 2026-03-25 4/200 2026-03-25 22:56 by 418490947
[考研] 考研调剂 +6 呼呼?~+123456 2026-03-24 6/300 2026-03-25 22:55 by 418490947
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +9 RichLi_ 2026-03-25 9/450 2026-03-25 22:21 by 418490947
[考研] 309求调剂 +3 gajsj 2026-03-25 4/200 2026-03-25 22:01 by 无际的草原
[考研] 材料与化工 322求调剂 +6 然11 2026-03-19 6/300 2026-03-25 18:37 by haxia
[考研] 材料学硕333求调剂 +4 北道巷 2026-03-24 4/200 2026-03-25 14:16 by mapenggao
[考研] 求调剂323材料与化工 +4 1124361 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:19 by shulmg
[考研] 化学调剂 +6 yzysaa 2026-03-21 6/300 2026-03-25 09:27 by aa331100
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-21 6/300 2026-03-24 15:03 by 余意卿
[考研] 一志愿华东理工大学081700,初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 一志愿国科过程所081700,274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
信息提示
请填处理意见