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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

[求助] 基因组DNA直接电泳的结果，请问是怎么回事 已有3人参与

各位大侠
      一个月前，我采用的是天根的试剂盒提取的基因组DNA ，保存在-20的冰箱，后做PCR，跑电泳，有目的条带，于是重复方法对余下样品进行上述步骤，结果发现电泳无条带，多次重复也没有条带。再次重复最初样品，也无条带。
      这几天，又重新提取基因组DNA，发生的现象是基因组DNA电泳出现拖尾，PCR样品无条带，求各位指教？是提取的试剂盒的问题，不易于DNA的保存还是PCR出现的额问题，求指教，谢谢!另，我们的样品是干燥过的动物组织，是否不是新鲜的样品也有影响，谢谢

基因组DNA直接电泳的结果，请问是怎么回事
基因组DNA直接电泳，18ul样加2ul loadingbuffer


基因组DNA直接电泳的结果，请问是怎么回事-1
10u了PCR 产物电泳
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1楼 2015-08-19 14:26:58
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BBMC-2012

木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
雨儿天0320: 金币+1, ★有帮助 2015-08-26 14:05:05
组织放久了，最好冻起来！不会酒精保存的，最不靠谱！

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2楼2015-08-19 16:53:12
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
雨儿天0320: 金币+1, ★有帮助 2015-08-26 14:05:13
DNA有降解，但是做模板应该还行，PCR时是不是模板加多了。
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3楼2015-08-20 00:10:45
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huangxin2011

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
雨儿天0320: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-08-26 14:05:25
目测模版加多了，测个浓度，体系中的模版还是别太多。我们这边50ng/ul，1ul就够10微体系
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4楼2015-08-20 11:37:37
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by stone2239 at 2015-08-20 00:10:45
DNA有降解，但是做模板应该还行，PCR时是不是模板加多了。

PCR反应时，模版只加了0.3uL
基因组DNA电泳时，是担心未能提取成功，因此只用了2uL Loading Buffer及18ul 样品
我现在不明白的是基因组DNA直接电泳后出现的这个现象，是由于DNA降解还是因为样品量过多还是因为各种大小的片段掺毒不同造成的，谢谢
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5楼2015-08-20 13:34:19
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by huangxin2011 at 2015-08-20 11:37:37
目测模版加多了，测个浓度，体系中的模版还是别太多。我们这边50ng/ul，1ul就够10微体系

PCR中模版只加了0.3uL，没有现象，是怎么回事呢
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6楼2015-08-20 13:35:55
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