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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

[求助] 基因组DNA直接电泳的结果,请问是怎么回事 已有3人参与

各位大侠
      一个月前,我采用的是天根的试剂盒提取的基因组DNA ,保存在-20的冰箱,后做PCR,跑电泳,有目的条带,于是重复方法对余下样品进行上述步骤,结果发现电泳无条带,多次重复也没有条带。再次重复最初样品,也无条带。
      这几天,又重新提取基因组DNA,发生的现象是基因组DNA电泳出现拖尾,PCR样品无条带,求各位指教?是提取的试剂盒的问题,不易于DNA的保存还是PCR出现的额问题,求指教,谢谢!另,我们的样品是干燥过的动物组织,是否不是新鲜的样品也有影响,谢谢

基因组DNA直接电泳的结果,请问是怎么回事
基因组DNA直接电泳,18ul样加2ul loadingbuffer


基因组DNA直接电泳的结果,请问是怎么回事-1
10u了PCR 产物电泳
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by stone2239 at 2015-08-20 00:10:45
DNA有降解,但是做模板应该还行,PCR时是不是模板加多了。

PCR反应时,模版只加了0.3uL
基因组DNA电泳时,是担心未能提取成功,因此只用了2uL Loading Buffer及18ul 样品
我现在不明白的是基因组DNA直接电泳后出现的这个现象,是由于DNA降解还是因为样品量过多还是因为各种大小的片段掺毒不同造成的,谢谢
5楼2015-08-20 13:34:19
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BBMC-2012

木虫 (知名作家)


【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
雨儿天0320: 金币+1, 有帮助 2015-08-26 14:05:05
组织放久了,最好冻起来!不会酒精保存的,最不靠谱!

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-08-19 16:53:12
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
雨儿天0320: 金币+1, 有帮助 2015-08-26 14:05:13
DNA有降解,但是做模板应该还行,PCR时是不是模板加多了。
3楼2015-08-20 00:10:45
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huangxin2011

捐助贵宾 (小有名气)


【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
雨儿天0320: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-08-26 14:05:25
目测模版加多了,测个浓度,体系中的模版还是别太多。我们这边50ng/ul,1ul就够10微体系
4楼2015-08-20 11:37:37
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