应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 用LATaq酶PCR的产物电泳条带拖带，能切胶回收做TA克隆吗？
61/1返回列表
查看: 2945  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xiangqin90

新虫 (初入文坛)

[求助] 用LATaq酶PCR的产物电泳条带拖带，能切胶回收做TA克隆吗？ 已有2人参与

用EasyTaq酶PCR后条带较为清晰，但用LATaq酶P却出现严重的拖尾，这是怎么回事？优化几次PCR条件之后，还是有这样的拖带，我能切胶回收做TA克隆吗？

用LATaq酶PCR的产物电泳条带拖带，能切胶回收做TA克隆吗？
2015.1.22.jpg


用LATaq酶PCR的产物电泳条带拖带，能切胶回收做TA克隆吗？-1
2015.1.20.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
想要做的更好
1楼 2015-01-22 16:17:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-01-23 13:47:00
目的条带大小正确，可以回收，纯化后测序，或者直接做TA克隆，测序。
赞一下 回复此楼
2楼2015-01-22 16:49:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangqin90

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-22 16:49:20
目的条带大小正确，可以回收，纯化后测序，或者直接做TA克隆，测序。

现在不清楚目的条带大小，但是是用保真性高的那个条带（前面的图）切胶回收还是后面低的回收呢？
赞一下 回复此楼
想要做的更好
3楼2015-01-22 18:13:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晞朔

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiangqin90 at 2015-01-22 18:13:48
现在不清楚目的条带大小，但是是用保真性高的那个条带（前面的图）切胶回收还是后面低的回收呢？...

那你只能两条都切了，回收PCR测序再去比对吧。或许你会有新的发现。
赞一下 回复此楼
4楼2015-01-22 18:23:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangqin90

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-22 18:23:17
那你只能两条都切了，回收PCR测序再去比对吧。或许你会有新的发现。...

切哪个酶P的呢？
赞一下 回复此楼
想要做的更好
5楼2015-01-22 18:32:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-01-23 13:47:06
请问你的模板是多少bp（kb）的呢，不超过10kb不建议使用LA ,对扩增可能会起到反作用。直接做TA克隆的，建议还是第一张图easy Taq扩增的那个。如果想保证扩增的特异性或不拖尾，小于10kb的建议使用热启动聚合酶即可，高保真酶也是，可能会将你的模板降解掉，如果对下游应用没有精确要求（如测序类似的），也不建议使用高保真酶。
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
6楼2015-01-23 10:09:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xiangqin90 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:33 by vZfe6xYu34yj
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +4 两三岁ss 2026-09-14 4/200 2026-09-14 20:29 by 班主任的同桌
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-14 18:01 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:48 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:25 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:12 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:00 by Aj1rhIDL5ixY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:57 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:48 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:45 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:37 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:21 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 14:57 by Aj1rhIDL5ixY
[基金申请] 求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？ +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
[基金申请] 面上有专家说实验设备不是我们单位的 +6 zj_muchong 2026-09-08 8/400 2026-09-11 06:56 by suifengdao
[有机交流] 科研求助 10+4 我吃一只鱼 2026-09-07 4/200 2026-09-10 08:32 by 0940628
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭