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necromancerx

新虫 (初入文坛)

[求助] 请大家帮忙看看小弟做的dgge 新人第一次做 dna跑不开

小鼠肠道细菌的PCR产物 大概200-250bp左右
用的35%——65%变性梯度 220v预电泳10分钟 然后60v电泳16小时 温度60度
银染方法
PCR产物做了凝胶电泳 略有拖尾现象
不知道为什么跑不开 我觉得应该是我做胶的问题 要不就是放架子进去哪里没弄到电流？
请大神指教 多谢多谢 小弟就1.5金币 都扔出来啦

未命名.JPG
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1楼 2012-10-24 11:19:53
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xiadongliang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
necromancerx: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-10-25 11:19:17
配胶浓度，缓冲液会不会有问题？
或者你的高低浓度的胶有没有弄错了？
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2楼2012-10-24 13:21:27
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necromancerx

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiadongliang at 2012-10-24 13:21:27
配胶浓度，缓冲液会不会有问题？
或者你的高低浓度的胶有没有弄错了？

我今天想了半天 我那些液都是新配的 APS也是新货
唯一的可能是那个中性负载液我没配 听人说直接用普通电泳的6*loading buffer就行 我就直接拿这个和dna混合以后加了
这个6*loading buffer是不是不行啊？

多谢你的回复啊 麻烦您继续指教我一下
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3楼2012-10-25 11:18:47
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xiadongliang

金虫 (正式写手)
loading buffer是没有问题的。可以直接使用。
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4楼2012-10-25 11:21:54
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necromancerx

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiadongliang at 2012-10-24 13:21:27
配胶浓度，缓冲液会不会有问题？
或者你的高低浓度的胶有没有弄错了？

那就奇怪了 我高浓度的胶 65%的 加到离出口近的那边管 低浓度加左边的 然后转子混匀 中速加入到三明治。
距离还有1。5cm停止 加入1ml去离子水封口 凝固以后加入0%的胶封口
应该没问题啊。。。
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5楼2012-10-25 12:56:23
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necromancerx

新虫 (初入文坛)
问题已经解决
是玻璃板底下的胶带没打开。。。
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6楼2012-11-05 11:53:00
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