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PCR产物电泳有拖尾,应该怎么改进
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foreverse7en
新虫
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帖子: 22
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虫号: 3335190
[交流]
PCR产物电泳有拖尾,应该怎么改进
DNA相同,6个引物,12个点样孔一个引物
植物叶片DNA
DNA50ng/ul 1ul
10*buffer 2ul
dNTP 10mmmol/L 0.25ul
Taq酶 5U/ul 0.2ul
引物 10mmol/L 1ul
20ul体系
94℃3min
94℃1min
55℃±6摄氏度(十二个温度)
72℃2min
35个循环
跑胶跑不好,能帮我分析一下应该怎么改进吗
2016.3.12.RJ3.引物7-12.30分钟.jpg
2016.3.11.LF3.引物7-12.jpg
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1楼
2016-03-14 17:18:16
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hc123
金虫
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金币: 409.6
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在线: 43.1小时
虫号: 2636602
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好,我觉得只要有两个原因,一个是模版降解,二是引物非特异性,不是拖尾而是扩增非特异
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16楼
2016-03-14 19:30:36
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贾子阳009
铜虫
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(幼儿园)
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帖子: 210
在线: 61.5小时
虫号: 2104957
★
foreverse7en(金币+1): 谢谢参与
PCR没跑过拖尾的
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4楼
2016-03-14 17:57:17
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卡维斯
金虫
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应助: 147
(高中生)
金币: 552.9
帖子: 301
在线: 56.3小时
虫号: 1477032
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
模板有部分降解。你可以把基因组取五微升跑电泳看看是否是有单一条带
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14楼
2016-03-14 18:56:38
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yanyuxiaoxi
7楼
2016-03-14 18:04
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foreverse7en(金币+1): 谢谢参与
嗯
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