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俊锋

新虫 (初入文坛)

[求助] SMART 5,RACE试剂盒 已有1人参与

各位前辈,你好
做5,RACE,扩增5'端未知序列,反义引物合成的5'端需要磷酸化还是要其他修饰吗?为什么要引物5'端需要修饰啊?只要引物与模板链合成不就好了吗?
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star013

新虫 (知名作家)


5楼2016-03-20 22:08:27
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renyi2015

新虫 (小有名气)

你好,5'引物是与cdna反向互补的是吗?

发自小木虫Android客户端
2楼2016-03-12 12:55:40
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renyi2015

新虫 (小有名气)

3楼2016-03-12 12:56:11
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lesliemin

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

仅扩片段不需要加p吧。如果扩增得到片段后还有
要克隆。需要考虑克隆到TA载体,需要选择能够产生A的Taq酶。如果扩出的片段要进行平端链接,则需要给PCR产物加P,或者在PCR前把给引物用T4Kinease做加p反应。
4楼2016-03-13 06:10:47
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