应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » race 求助
51/1返回列表
查看: 714  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wqj1988926

金虫 (正式写手)

[求助] race 求助

最近做用race反应，用的是takara的smart race试剂盒，有些细节上的问题想向做过的前辈们请教。
1.制备race ready cdna时，rna的260/230的值只有1.3左右，对实验会不会有影响
2.制备5，race反应过程中的smart oligo是要和rna、cds primer A一起72℃ 3min，42℃ 2min吗
3.设计了基因特异性引物，与UPM一起pcr，只有拖尾的一块，如何解决？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
风雪夜归人
1楼 2011-11-03 13:21:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqj1988926

金虫 (正式写手)
怎么没人呀，都快沉了
赞一下 回复此楼
风雪夜归人
2楼2011-11-06 19:02:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
帮顶下~
周末人少，等等吧。
赞一下 回复此楼
3楼2011-11-06 21:56:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gsbaiyuechen

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

wqj1988926(金币+2): 2012-02-15 20:04:30
把模板稀释50倍、100倍、200倍试试，应该是没有问题的，尽量试试使用巢式PCR来进行试验，退火温度一定要高
赞一下 回复此楼
向着圣地冲呀！
4楼2011-11-08 14:33:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘仕博

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 谢谢应助 2012-01-05 13:39:58
wqj1988926(金币+2): 2012-02-15 20:04:49
1.RACE一般对RNA的要求还是挺高的吧，所以尽量保证RNA的质量吧，如果最开始的模板都质量不好的话以后的实验结果就很难保证。
2.根据说明书吧，小木虫里面也有的下载。
3.如果只有一段拖尾的话是不是引物设计的不对呀，或者改变下PCR的反应条件看下。我做了几个基因的RACE，就是因为引物设计的问题，导致最后的反应条件摸索了很久，其实不一定要按照他给的条件，根据你的引物自己摸索下看看吧。
赞一下(1人) 回复此楼
生命在于折腾~
5楼2012-01-05 13:35:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wqj1988926 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭