24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 679  |  回复: 4

wqj1988926

金虫 (正式写手)

[求助] race 求助

最近做用race反应,用的是takara的smart race试剂盒,有些细节上的问题想向做过的前辈们请教。
1.制备race ready cdna时,rna的260/230的值只有1.3左右,对实验会不会有影响
2.制备5,race反应过程中的smart oligo是要和rna、cds primer A一起72℃ 3min,42℃ 2min吗
3.设计了基因特异性引物,与UPM一起pcr,只有拖尾的一块,如何解决?
回复此楼
风雪夜归人
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqj1988926

金虫 (正式写手)

怎么没人呀,都快沉了
风雪夜归人
2楼2011-11-06 19:02:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

帮顶下~
周末人少,等等吧。
3楼2011-11-06 21:56:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gsbaiyuechen

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

wqj1988926(金币+2): 2012-02-15 20:04:30
把模板稀释50倍、100倍、200倍试试,应该是没有问题的,尽量试试使用巢式PCR来进行试验,退火温度一定要高
向着圣地冲呀!
4楼2011-11-08 14:33:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘仕博

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 谢谢应助 2012-01-05 13:39:58
wqj1988926(金币+2): 2012-02-15 20:04:49
1.RACE一般对RNA的要求还是挺高的吧,所以尽量保证RNA的质量吧,如果最开始的模板都质量不好的话以后的实验结果就很难保证。
2.根据说明书吧,小木虫里面也有的下载。
3.如果只有一段拖尾的话是不是引物设计的不对呀,或者改变下PCR的反应条件看下。我做了几个基因的RACE,就是因为引物设计的问题,导致最后的反应条件摸索了很久,其实不一定要按照他给的条件,根据你的引物自己摸索下看看吧。
生命在于折腾~
5楼2012-01-05 13:35:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wqj1988926 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 22专硕求调剂 +10 haoyun上岸 2026-04-11 12/600 2026-04-16 22:21 by 猪会飞
[考研] 一志愿中科大材料与化工,353分还有调剂学校吗 +7 否极泰来2026 2026-04-15 9/450 2026-04-16 13:40 by liumingli7817
[考研] 初试324 中药学 一志愿天中医 求调剂 +4 李的Lucky 2026-04-10 4/200 2026-04-16 09:22 by fqwang
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +4 白云123456789 2026-04-13 4/200 2026-04-16 00:18 by 粉沁若尘
[考研] 通信工程求调剂!!! +6 zlb770521 2026-04-14 6/300 2026-04-15 20:00 by 学员JpLReM
[考研] 297工科调剂? +14 河南农业大学-能 2026-04-13 15/750 2026-04-15 13:25 by 黑科技矿业
[考研] 调剂求收留 +34 果然有我 2026-04-10 35/1750 2026-04-15 13:05 by 西北望—风沙
[考研] 211本科材料化工求调剂 +19 YHLAH 2026-04-11 23/1150 2026-04-14 22:25 by fenglj492
[考研] 335求调剂 +19 想上岸呀!! 2026-04-12 21/1050 2026-04-14 16:23 by Art1977
[考研] 材料专业344求调剂 +17 hualkop 2026-04-10 22/1100 2026-04-14 16:21 by sxdj2
[考研] 105500药学求调剂 +4 x_skys 2026-04-12 4/200 2026-04-14 13:37 by rndfc
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +13 drizzle_9 2026-04-12 14/700 2026-04-13 10:26 by Faiz5552
[考研] 求调剂288 +7 ioodiiij 2026-04-10 9/450 2026-04-13 08:33 by Hayaay
[考研] 344 材料专业 求调剂211 无地域要求 +8 hualkop 2026-04-11 8/400 2026-04-12 22:24 by fqwang
[考研] 电气专硕320求调剂 +6 小麻子111 2026-04-10 6/300 2026-04-12 10:54 by lemon6009
[考研] 296求调剂 +14 汪!?! 2026-04-10 16/800 2026-04-12 10:48 by zhouyuwinner
[考研] 326求调剂 +6 Shansyn 2026-04-10 6/300 2026-04-12 09:46 by hammer3
[考研] 22408 327分求调剂 +4 韵风kon 2026-04-10 4/200 2026-04-11 09:51 by 猪会飞
[考研] 265求调剂 +12 风说她早忘了 2026-04-10 13/650 2026-04-10 18:56 by chemisry
[考研] 一志愿京区985,085401电子信息,本科电子信息 +3 阳光开朗的男孩 2026-04-10 3/150 2026-04-10 16:29 by sophia_93
信息提示
请填处理意见