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13579_t

银虫 (小有名气)

[交流] 求助RNA电泳跑不出来 已有9人参与

如图,为同一真菌在三种不同条件下RNA电泳图)(前两者为1,中间两者为2,最后两者看不到条带的为3),从取样到提取全过程都是相同的,用nano drop 定量,1浓度为26ng/ul,2浓度为160ng/ul,3浓度为220ng/ul,并且OD260/280比值都在2左右。 但为什么前两者有电泳条带,而3完全没有。请前辈们帮忙分析一下.用的是生工的trizol试剂盒提取。

求助RNA电泳跑不出来
3.1.JPG
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fighting
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13579_t

银虫 (小有名气)

哦,不好意思改一下,是最后四个都是3号。
fighting
2楼2016-03-03 11:02:14
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无情无义1991

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
浓度太低,降解严重
3楼2016-03-03 15:40:18
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13579_t

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 无情无义1991 at 2016-03-03 15:40:18
浓度太低,降解严重

这个条件之前都能提出来而且质量很好,最近提了5次都这样,跟之前操作完全一样啊。能帮我分析为什么降解了么?

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fighting
4楼2016-03-03 16:13:58
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无情无义1991

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 13579_t at 2016-03-03 16:13:58
这个条件之前都能提出来而且质量很好,最近提了5次都这样,跟之前操作完全一样啊。能帮我分析为什么降解了么?
...

操作要迅速 还有可能就是跑胶时就降解了
5楼2016-03-03 17:03:29
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ConnConn

新虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
提取时加热,65度十分钟,提取效率会高许多

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6楼2016-03-03 23:19:44
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13579_t

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by ConnConn at 2016-03-03 23:19:44
提取时加热,65度十分钟,提取效率会高许多

这是RNA提取不是DNA啊,加热肯定降解啊!

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fighting
7楼2016-03-03 23:38:25
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ConnConn

新虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 13579_t at 2016-03-03 23:38:25
这是RNA提取不是DNA啊,加热肯定降解啊!
...

不会的,相信我,我们一直这么提。TRIZol里rna没那么容易降解。RNA溶解后暂放5分钟再电泳

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8楼2016-03-04 00:19:09
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aimaonbu

银虫 (初入文坛)

9楼2016-03-04 06:47:29
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xinlanyu27

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以尝试其他牌子的TRIZOL

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癌uzbekistan
10楼2016-03-04 07:11:34
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