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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 求助RNA电泳跑不出来
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13579_t

银虫 (小有名气)

[交流] 求助RNA电泳跑不出来 已有9人参与

如图，为同一真菌在三种不同条件下RNA电泳图）（前两者为1，中间两者为2，最后两者看不到条带的为3），从取样到提取全过程都是相同的，用nano drop 定量，1浓度为26ng/ul,2浓度为160ng/ul,3浓度为220ng/ul，并且OD260/280比值都在2左右。 但为什么前两者有电泳条带，而3完全没有。请前辈们帮忙分析一下.用的是生工的trizol试剂盒提取。

求助RNA电泳跑不出来
3.1.JPG
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fighting
1楼 2016-03-03 10:59:10
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13579_t

银虫 (小有名气)
哦，不好意思改一下，是最后四个都是3号。
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fighting
2楼2016-03-03 11:02:14
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无情无义1991

铜虫 (小有名气)
★
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浓度太低，降解严重
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3楼2016-03-03 15:40:18
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13579_t

银虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by 无情无义1991 at 2016-03-03 15:40:18
浓度太低，降解严重

这个条件之前都能提出来而且质量很好，最近提了5次都这样，跟之前操作完全一样啊。能帮我分析为什么降解了么？

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fighting
4楼2016-03-03 16:13:58
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无情无义1991

铜虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by 13579_t at 2016-03-03 16:13:58
这个条件之前都能提出来而且质量很好，最近提了5次都这样，跟之前操作完全一样啊。能帮我分析为什么降解了么？
...

操作要迅速 还有可能就是跑胶时就降解了
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5楼2016-03-03 17:03:29
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ConnConn

新虫 (著名写手)
★
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提取时加热，65度十分钟，提取效率会高许多

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6楼2016-03-03 23:19:44
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13579_t

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ConnConn at 2016-03-03 23:19:44
提取时加热，65度十分钟，提取效率会高许多

这是RNA提取不是DNA啊，加热肯定降解啊！

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fighting
7楼2016-03-03 23:38:25
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ConnConn

新虫 (著名写手)
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7楼: Originally posted by 13579_t at 2016-03-03 23:38:25
这是RNA提取不是DNA啊，加热肯定降解啊！
...

不会的，相信我，我们一直这么提。TRIZol里rna没那么容易降解。RNA溶解后暂放5分钟再电泳

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8楼2016-03-04 00:19:09
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aimaonbu

银虫 (初入文坛)
换trizol

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9楼2016-03-04 06:47:29
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xinlanyu27

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以尝试其他牌子的TRIZOL

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癌uzbekistan
10楼2016-03-04 07:11:34
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