| 查看: 594 | 回复: 0 | ||
极道始之魔银虫 (小有名气)
|
[求助]
northern bloting
|
|
最近做northern实验，我用的是点杂交的方法。RNA样品是是已经降解了的，要做它的种属鉴定。设计了6个生物素标记的探针，一直坐不出结果。尼龙膜上没有明显的斑点，有时只有很小的一颗，所以不能确定。后来做了几次阳性对照，直接把探针点在膜上，发现有很明显的杂交斑点，所以操作不存在问题。目前的问题就是RNA样品和探针杂交不上。除了换探针外，目前还存在哪些问题？ 有以下疑惑 1.交杂温度，这个说是要慢慢摸索的，说是比TM值低20摄氏度左右，这个没问题 2。RNA样品需要怎么处理啊，有试过95摄氏度5min，再放冰上，也试过加甲醛等变性剂 3.试过跑电泳，转膜没成功，这个可能样品量太少了 ，求助各位道友 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有57人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
点击这里搜索更多相关资源