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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 毕赤酵母表达酶
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肉肉肉.

铁虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母表达酶 已有2人参与

各位大神好，最近老板让我在毕赤酵母中表达一种原核细菌来源的酶，非得让我在酵母中表达，我提议在大肠中表达不同意，真的是要晕死！现在有一些问题想请教大神们：
1.原核来源的蛋白在酵母中表达是不是一定需要做密码子优化？
2.做了密码子优化会不会对这种酶的性质产生影响？不做优化的酶可以在酵母中成功表达吗？
谢谢大家了！

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1楼 2016-02-27 21:38:02
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

原海亮

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+4, 鼓励回帖交流 2016-02-29 22:50:54
密码子优化主要就是针对这样的跨界表达的，原核和真核密码子偏好性还是有区别的，所以进行密码子优化是有必要的。另外，进行密码子优化的目的就是在保证氨基酸序列不变的情况下，将原有的密码子换成酵母里常用的，对于翻译出来的最终蛋白是没有影响的，就像搬运一件物品一样，这个地方喜欢用马车，而在另一个地方人家喜欢用卡车，而且那里根本找不到马车，所以你只有换成人家的喜欢的工具，但最终的目的都一致，就是把对应的氨基酸运过来！

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肉肉肉.
天空才是极限，我有信心飞的更高！
3楼2016-02-28 10:39:42
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-02-29 22:51:14
你导师是明白人，这叫反串，大肠表达估计早有人表达过了，你用毕赤分泌表达，说不定产量更好，稳定性更好，可以多讨论一下，便于发文章

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5楼2016-02-28 20:13:22
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普通回帖

肉肉肉.

铁虫 (小有名气)
跪求各位大神指点呀

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2楼2016-02-28 01:02:39
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肉肉肉.

铁虫 (小有名气)
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引用回帖:
3楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-02-28 10:39:42
密码子优化主要就是针对这样的跨界表达的，原核和真核密码子偏好性还是有区别的，所以进行密码子优化是有必要的。另外，进行密码子优化的目的就是在保证氨基酸序列不变的情况下，将原有的密码子换成酵母里常用的，对 ...

多谢大神！！超级感谢！！好厉害啊！

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4楼2016-02-28 14:23:11
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肉肉肉.

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by biosci at 2016-02-28 20:13:22
你导师是明白人，这叫反串，大肠表达估计早有人表达过了，你用毕赤分泌表达，说不定产量更好，稳定性更好，可以多讨论一下，便于发文章

看一篇文献里面写表达这个酶的只有大肠，其他载体都没有成功过，我要是表达不出来就不能毕业啦大神！！！

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6楼2016-02-29 15:33:32
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ConnConn

新虫 (著名写手)
密码子优化只是为了提高表达效率

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7楼2016-02-29 15:58:29
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huyan0817

木虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-02-29 22:51:30
一般大肠杆菌能表达的，酵母也会表达，可以先做酵母胞内表达再做分泌表达。

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肉肉肉.
8楼2016-02-29 16:04:11
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肉肉肉.

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by ConnConn at 2016-02-29 15:58:29
密码子优化只是为了提高表达效率

嗯嗯 不优化的话影响大吗

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9楼2016-02-29 16:14:15
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肉肉肉.

铁虫 (小有名气)
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引用回帖:
8楼: Originally posted by huyan0817 at 2016-02-29 16:04:11
一般大肠杆菌能表达的，酵母也会表达，可以先做酵母胞内表达再做分泌表达。

好的！谢谢大神！

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10楼2016-02-29 16:14:29
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