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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 一般培养条件下，毕赤酵母表达原核基因酶蛋白，表达量会有多少mg？
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jjwhl

银虫 (正式写手)

[求助] 一般培养条件下，毕赤酵母表达原核基因酶蛋白，表达量会有多少mg？ 已有1人参与

各位用毕赤酵母表达酶基因的虫友，在一般培养条件下，表达量会有多少mg/L？最近，毕赤酵母表达酶蛋白，SDS-PAGE电泳有目的条带，酶活测不到，超滤浓缩后可以测到，不知道是不是表达量太低的原因啊......！求各位虫友帮助
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1楼 2014-09-10 17:56:09
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

SDS-PAGE都能跑出来？
那说明
1、你看到的条带不是你的目标蛋白；
2、表达的目标蛋白没有活性。
至于表达量，这个可以在文献中查查，这个不重要
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2楼2014-09-24 14:42:38
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jjwhl

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by laozuzunzhe at 2014-09-24 14:42:38
SDS-PAGE都能跑出来？
那说明
1、你看到的条带不是你的目标蛋白；
2、表达的目标蛋白没有活性。
至于表达量，这个可以在文献中查查，这个不重要

是可以跑出来，阴性对照没有。而且超滤浓缩后，可以明显测出来，所以考虑是不是表达量太低，从而酶蛋白浓度低，而测不到酶活
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3楼2014-09-24 15:37:27
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by jjwhl at 2014-09-24 15:37:27
是可以跑出来，阴性对照没有。而且超滤浓缩后，可以明显测出来，所以考虑是不是表达量太低，从而酶蛋白浓度低，而测不到酶活...

电泳能跑出来，说明浓度不会太低的，所以考虑是不是表达的目标蛋白没有活性。
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4楼2014-09-24 16:31:24
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江灵敏

新虫 (小有名气)
我也在做毕赤酵母表达，但是我的跑SDSPAGE没有目的蛋白，没有表达出来，求赐教一下，谢谢

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5楼2018-04-17 23:22:06
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