序列也已经过测序，用的pPIC9K载体，也进行过多拷贝筛选，所用菌株全是从2mg/mL的平板上挑取的，发酵的话用的1.5%的甲醇浓度诱导...要么我的条带跑到哪儿，哪里以下就是黑的，不是拖尾3.tif...

3、电转之后转化子特别少，电转参数3kv，6ms，请问怎么才能...我是初始ph为5.0，用的是bmmy培养基6、我用的载体ppic9k按理说是分泌表达，但是我分析发酵上清，发现目的蛋白表达量特别低，之前...

胞内表达载体主要有：pHIL-D2，pA0815，pPIC3K，pPICZ，pHWO10，pGAPZ，pGAPZa(Invitrogen)，pPIC3.5K等。工程菌株Y11430，MG1003，GS115(AOX1)，KM71，SMD1168。毕赤酵母宿主菌常用的有GS...

质粒：pPIC3K、pPICZA、pPIC3.5K菌株：X33、GS115主要应用：适合于稳定表达有功能的外源蛋白质，而且可大规模发酵，是理想的重组真核蛋白生产制备工具。昆虫系统属于真核细胞表达系统，但...

我用毕赤酵母KM71进行表达抗菌肽，分子量为3kd-8kd之间，构建载体没有问题，载体为pPIC9K，进行筛选也可以筛选到，用载体上的引物...加甲醇的量为0.5%，诱导条件为250rpm/30°，酵母生长为2升...

应该选择GS115还是KM71，3....目标蛋白本身有信号肽，在插入时需要去除吗5.pPICZαA有HIS标签可以用于蛋白纯化吗，网上的pPIC9k-his也可以吧，现在纠结这两个怎么选择后续在做的时候可能还有...

我想请问一下，酵母中转入了含抗性基因的载体，如果这个酵母不灭活直接给小鼠口服喂养的话，酵母中的抗性基因是否对小鼠有影响或者有害呢？比如pPIC3.5K载体和pPICZαA载体，请教各位大神。

求助，如何确定pPIC3.5k质粒中的5'AOX启动子序列，TT区序列呢？我现在在改造质粒，想把这一段给P下来，但是找不到确切位置不知道怎么设计引物。

质粒ppic3.5k酵母km71，求一酵母转化方法，把这个质粒转进细胞质或基因组都行，一定是化学转化法，实验室没电转仪，步骤越详细越好biostar2009飞约疯人院wizardfanyoulinglyw

是质粒图谱，不是序列.

各位师兄师姐师弟师妹们，因为实验需要用pET42a（+）载体，希望与虫友们交换，可交换的载体有pPIC9K、pPIC3.5K、pET28a（+）、pET32a（+）、pESC系列等，有意者麻烦多多交流。

3.pPICZA这个载体手册里面写到说插入的片段必须含有ATG这个...5.pPIC9K这个载体说明书里面说目的基因的ORF（开放式阅读框）要与α-factorsignalsequence这个信号肽序列读码框一致并且在它的...

β-D-1,4-内切木聚糖酶(EC.3.2.1.8)是木聚糖降解酶系中最重要...并克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K的多克隆位点，构建重组质粒pPIC9K-xynAm，电击转化至毕赤酵母GS115菌株中，以29℃、0.5%甲醇...

我做的是一个原核来源的胞内酶，密码子优化后转入毕氏酵母KM71，用的pPIC3.5K做载体，在酵母里面表达量不高，和之前密码子没优化前转到酵母里面的酶活差不多，求问有没有大神做过酵母胞内...

本人因为要用毕赤酵母做表达，需要pPICZαA质粒。希望各位大侠能够惠赠一些，交换其他质粒也可以，我这里有pPIC3.5K和pPIC9K两种质粒。

我用的是ppic9k的质粒载体与目的基因融合表达载体，然后倒入TOP10中，然后培养，双酶切和测序都是对的，就是倒入到GS115这一步...3h后，测量OD600=1，然后将YPD溶液倒入两个灭菌好的塑料试管...

最近做毕赤胞内表达，想要求助质粒pPIC3.5K。作为答谢，本人手里有pPIC9K，GS115等资源可以反赠。本人邮箱'liuxuesheng86163.com'

be1.35+-0.17nm,0.16s(-1)and6.3s,respectively.Thek(diss)(0)valuewasalittlelowerthanthat...variableconcentration(0-1.5wt%).Theperformancecharacteristicsandtreated...

各位虫友，我最近在做重组pPIC9K质粒转化毕赤酵母GS115，用Bpu1102I内切酶进行线性化切割，可每次切完以后跑胶都会出现严重拖带，在所要的...可都出现这个问题，酶切时间也有尝试分别用5、3h...

划板挑单克隆菌落表面光滑，之前转化未线性化的pPIC3.5k后长出来的单克隆也是表面光滑的，后来发现质粒要线性化，结果转入线性化质粒后菌落菌落形态就变了，表面有菌丝状东西，有点像霉菌，...

我PCR的目的基因4600bp，想直接去连接载体pPIC3.5k（大概9000bp），按照正常的连接过程一直都连接不上，各位有谁做过类似的实验吗，求帮助啊！

本人手中目前可用于交换的载体、质粒、菌种有：毕赤酵母载体：pAO815、pPIC9K、pPIC3.5K酿酒酵母载体：pPYES2/CT、pPYES2/CT-lacZ杆状病毒载体：pVL1392原核载体：pUC18、pUC19菌株：毕赤...

哪位师哥师姐有毕赤酵母的pPIC3.5K/pA0815胞内表达载体或者其他的毕赤酵母胞内表达载体？我们实验室有毕赤酵母的胞外表达载体EasySelect中的pPICZαA和Multi-CopyPichiaExpressionKit中的...