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liuguanh

铁虫 (初入文坛)

[求助] 怎么培养乳酸菌,怎么培养基上什么也没有 已有4人参与

我正在做酸奶中的乳酸菌计数,用的是MRS和M17培养基,MRS培养基:蛋白胨10g;葡糖糖20g;柠檬酸三铵2g;磷酸氢二钾2g;牛肉膏10g;吐温-80 1ml;硫酸镁•7H2O 0.58g;琼脂15g;酵母膏4g;乙酸钠5g;硫酸锰0.05g;蒸馏水1000mL,121℃条件下灭菌20min。
培养条件是,37度。刚开始用,CO2浓度为5%,结果培养基上什么也没有。然后又在干燥器中点蜡烛培养,还是什么也没有,反复做也没用。
有没有成功培养过的,帮分析下什么原因。多谢啦。
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stevenlee8356

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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liuguanh(sytucom代发): 金币+2, 感谢应助,希望继续关注楼主回复,谢谢 2016-01-31 23:26:38
最可能的情况就是你在将做样液于培养基混合时吧乳酸菌给烧死了,温度过高混合,建议在45-50的温度,另外关于培养,乳酸菌属于兼性厌氧,很好养的
2楼2016-01-31 19:27:41
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fbcf7f7

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
liuguanh(sytucom代发): 金币+1, 感谢应助,希望继续关注楼主回复,谢谢 2016-03-31 23:22:46
原因有两个:1 像楼上说的平板倾注温度过高;2 建议用厌氧箱或者厌氧罐
3楼2016-02-01 08:44:15
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dxrgwu

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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liuguanh(sytucom代发): 金币+1, 感谢应助,希望继续关注楼主回复,谢谢 2016-03-31 23:22:53
sytucom: 金币+2, 回帖精彩,谢谢参与 2016-03-31 23:23:01
sytucom: 2016-03-31 23:23:46
现在的酸奶大部分产品属于多菌种发酵,除了嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌外,有的产品还有双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌等,其中,除了双歧杆菌属于严格厌氧菌,其余属于兼性厌氧菌,因此,在培养方式上,可采用厌氧罐培养。
除了控制培养基温度外,本人经验,还可以考虑一下,培养基成分对菌体生长的影响,尤其是牛肉膏和酵母膏的影响,特别是酵母膏,不同厂家的效果差异很大,国产和进口品牌有差异,国产品牌之间也有很大差异。可以多选几家公司的产品比较一下培养结果。另外,酵母膏添加量建议增加至0.5g.
最后,可以在培养基中加入L-半胱氨酸盐酸盐,添加量0.2g,降低培养基氧化还原电位,有利于双歧的生长。
4楼2016-02-01 09:20:51
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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sytucom: 金币+2, 感谢应助,希望继续关注楼主回复,谢谢 2016-03-31 23:23:12
乳酸菌培养一般都是5-7d,你可以多培养几天看看是不是时间的原因;
此外,你可以向MRS培养基中额外添加番茄汁和盐酸半胱氨酸,这个可以促进乳酸菌的生长
5楼2016-02-01 14:56:22
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kika8014

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
sytucom: 金币+2, 应助指数+1, 感谢应助,希望继续关注楼主回复,谢谢 2016-03-31 23:23:28
最大可能是菌种问题吧,重新活化试试
车到山前必有路
6楼2016-02-14 22:18:09
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