| 查看: 2508 | 回复: 9 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
毕赤酵母蛋白表达纯化 已有3人参与
|
|||
各位大神，如图所示，只看最右边的两个泳道，第一个是marker，倒数四个条带的分子量分别是10，15，25，35kD，第二个泳道是表达的目的条带，过了一个镍柱，1、按说应该就是目的条带了，空载是没有这个条带的，这个胶上没有跑空载，我还做过western，也能杂出目的条带，但是目的蛋白理论分子量本来应该是18kD左右，用原核表达出来的也是18kD左右，但是现在酵母表达出来的都在25kD附近了，好大，载体是ppiczαA，菌株是KM71H；2、过柱子纯化后的蛋白跑出来老是这个样子，显得好宽，我降低浓度后跑胶也是这么个样子，只是颜色浅一点，不知道是咋回事？胶浓度是15%的；3、而且还有一个现象是，有几次染色后脱色，时间脱久了后竟然把条带给脱没了，不知道是不是染色液用的次数太久了。希望有经验的大神帮忙解答一下，多谢啦 IMG_0854.jpg |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 蛋白表达纯化鉴定精华 |
» 猜你喜欢
要不要辞职读博？
已经有6人回复
-
实验室接单子
已经有3人回复
-
不自信的我
已经有10人回复
-
磺酰氟产物，毕不了业了！
已经有8人回复
-
求助:我三月中下旬出站，青基依托单位怎么办？
已经有10人回复
-
26申博（荧光探针方向，有机合成）
已经有4人回复
-
论文终于录用啦！满足毕业条件了
已经有26人回复
-
2026年机械制造与材料应用国际会议 （ICMMMA 2026）
已经有4人回复
-
Cas 72-43-5需要30g，定制合成，能接单的留言
已经有8人回复
-
北京211副教授，35岁，想重新出发，去国外做博后，怎么样？
已经有8人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 毕赤酵母GS115分泌表达不出目的蛋白
已经有3人回复
- 去垢剂CHAPS纯化毕赤酵母表达的膜蛋白
已经有6人回复
- 密码子优化后，毕赤酵母表达活性低
已经有3人回复
- 毕赤酵母体外表达菌株保存后使用问题
已经有4人回复
- 毕赤酵母表达外源蛋白量特别低怎么办
已经有1人回复
- 毕赤酵母蛋白表达
已经有24人回复
- 纯化后的重组蛋白用纯化后的重组蛋白酶切割，没有变化
已经有0人回复
- 毕赤酵母表达蛋白纯化
已经有10人回复
- 求白蛋白在毕赤酵母分泌表达后被蛋白酶降解的解决办法
已经有3人回复
- 毕赤酵母表达后，蛋白纯化
已经有2人回复
- 蛋白纯化
已经有13人回复
- 大家见到过毕赤酵母表达出的外源蛋白分子量比实际分子量小吗，而且还有活性？
已经有20人回复
- 【求助/交流】毕赤酵母表达载体的选择
已经有4人回复
10楼2016-03-24 00:03:35
2楼2016-01-24 18:04:37
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
易农植保: 金币+10, ★★★很有帮助, 嗯嗯 2016-01-26 20:33:20
易农植保: 金币+10, ★★★很有帮助, 嗯嗯 2016-01-26 20:33:20
|
您可以先试试看有没有活性，要是没有的话用去糖基化酶试试 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-01-24 18:06:47
4楼2016-01-24 18:08:01